小鼠胚胎胰腺干细胞的体外培养与鉴定

论文摘要

世界上约有一亿五千万人患有糖尿病,其中有近三千万在中国,而且近来糖尿病的发病率越来越高。升高的血糖以及各种综合症使糖尿病成为人类健康的最大凶手之一。胰岛移植的成功为世界上众多的糖尿病患者带来了美好的希望。但是,可用于移植的胰岛远远满足不了需求。我们实验室利用小鼠作为动物模型,建立了一个独特的胚胎胰腺细胞与op9-DL1饲养层细胞的共培养系统,op9-DL1可以激活Notch1信号通路并抑制胰腺干细胞的分化。因此,用这种方法培养起来的胚胎胰腺细胞在分裂的同时还有可能保持了干细胞的特性。实验结果表明,共培养系统成功地培养了E13.5-18.5天的胚胎胰腺干细胞。这些细胞成鹅卵石形,表达转录因子PDX-1,但不表达胰岛素原和转录因子ngn3（neurogenin）。更重要的是,新型生物聚脂材料PHBHHx可以刺激胚胎胰腺干细胞形成球状胰岛类似体,并增加胰岛素原、PDX-1、及ngn3转录物的表达水平。因此,我们的研究不仅具有重要的理论意义,还有可能为糖尿病的治疗作出贡献。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 英文缩略词表
• 第一章 前言
• 1.1 研究意义
• 1.2 国内外研究现状及分析
• 1.2.1 小鼠胰腺发育研究现状
• 1.2.2 生物科学与材料科学的结合容易产生新的重大突破
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验动物
• 2.2 主要实验试剂和材料
• 2.2.1 免疫组化试剂
• 2.2.2 主要抗体
• 2.2.3 生长因子
• 2.2.4 细胞培养试剂
• 2.2.5 RT-PCR相关试剂
• 2.3 仪器与设备
• 2.4 技术路线
• 2.4.1 小鼠胚胎胰腺干细胞的体外培养与鉴定
• 2.4.2 小鼠胚胎胰腺干细胞的分化
• 2.5 实验方法
• 2.5.1 实验动物
• 2.5.2 共培养系统建立
• 2.5.3 小鼠胚胎胰腺干细胞的鉴定
• 2.5.4 小鼠胚胎胰腺干细胞的体外分化
• 第三章 结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 第六章 问题与展望
• 参考文献
• 附录1
• 附录2：T7 RNA聚合酶正反馈表达系统在慢病毒载体制备中的应用
• 致谢
• 在校期间科研情况
• 个人简历