论文摘要
自1986年NO被证实为血管内皮舒张因子（EDRF）以来,大量研究结果表明,NO是重要的生物信使分子,对生物体的生理过程起着重要的调节作用[ 13],因此,建立快速准确的NO测定方法不仅能从本质上揭示某些生理现象,也为探索相关疾病的监控和病理研究提供技术保障。由于NO的易逸性且不稳定（半衰期约为5～60S,易被氧化）,使其测定非常困难。现已报道的检测生物体系中NO的方法有化学发光法、电子自旋共振光谱法、紫外可见及荧光光谱法、Greiss反应分析法和电化学测定法等。仅电化学测定法与传感器相结合可以实现在体测定,其中电极有不同类型的化学修饰,常见的电极修饰材料有金属卟啉类化合物、金属酞菁类化合物、席夫碱金属配合物及其它如邻苯二胺类高分子材料和纳米材料等[46],本文研制了两种不同敏感膜NO传感针,通过离体性能测试,与NO试剂盒在体测试结果进行的比较,认为NO传感针可进行在体测定。（一）一氧化氮传感针的研制与性能比较选用机械强度高、化学稳定性好的铂丝为基体电极,在其表面修饰一层在生理pH条件下带正电的脱乙酰甲壳素（chitosan ,CTS）膜,经NiSO4溶液处理后,再修饰一层Nafion膜,可有效地防止阴离子型及阳离子型干扰物质的影响,采用循环伏安法,用该传感针在扫描电压为600mV到-1000mV范围内测定NO标准溶液,线性范围为6.25×10-7～1.0×10-4mol/L,R2=0.9944。该传感针有好的选择性、重现性（RSD<5%）,能满足生理分析的要求。采用催化氧化法,采用铂丝作为工作电极,分别经磺化酞菁钴（CoTSPc）和四丁基高氯酸铵（TBAP）的DMSO溶液、Nafion膜的修饰后,通过测定NO进行比较,从中找到最优修饰方法,制备出NO传感针。该传感针的修饰条件是以0.05mol/L TBAP,2.5×10-3mol/L CoTSPC为底液在扫描电压-300到1300mV内循环扫描60圈后,在0.5%Nafion中浸泡15s和烘烤两次,线性范围为1×10-7～1.0×10-4mol/L,R2=0.9979。该传感针具有好的选择性、重现性（RSD<5%）,能满足生理分析的要求。研制的两种NO传感针都属于电催化氧化类化学工作电极,都是与NO在轴向形成配合物,配合物比处于溶液中的NO更容易发生电化学氧化,主要是因为其在电极表面降低了NO电化学氧化的活化能。对两种NO传感针的几项性能作了比较,分析了各NO传感针的优劣。（二）NO传感针与NO试剂盒在体测试比较与在体应用用两种NO传感针和NO试剂盒来观察大鼠血清及脑组织NO含量和NOS活性的变化,通过传感针与NO试剂盒测试结果比较,来评价NO传感针的在体测定性能,使NO传感针真正能达到实验应用水平。NO传感针在动物实验中加以应用,为脑缺血再灌注模型和经络实验提供了有力的技术支持,并为NO传感针的进一步发展奠定了基础。