乳酸葛根素的合成及药效学研究

论文摘要

葛根素（7,4’-二羟基-8-β-D-葡萄糖基异黄酮）为豆科葛属植物葛根提取的主要活性成分之一,有研究表明葛根素具有多种药理活性,如降低血管阻力,改善脑及冠脉循环,降低心肌耗氧量,调节NOS活性,抗氧化、抗癌及诱导癌细胞分化等作用,且有毒性小、代谢快等优点。但因异黄酮类化合物本身的结构特点,使葛根素的水溶性和脂溶性均较差,生物利用度不理想,制约了临床应用。为改善葛根素的上述缺点、提高生物利用度,本论文以葛根素为先导化合物,根据反应物结构和酰化反应特点,采用酰化法制备乳酸葛根素,然后用紫外光谱、红外光谱和核磁共振进行了结构确认。在工艺优化方面,本论文用均匀设计实验,优化了原料的配料比、溶剂用量、反应时间和温度等工艺条件,最后确定最佳的工艺条件为,原料的配料摩尔比1.4:1、反应温度:20℃、反应时间100min及吡啶用量1.0ml。对合成衍生物进行了理化性质及稳定性的初步研究。在稳定性方面,选择以外观及薄层色法谱鉴别、HPLC法测定含量、吸湿增重等为评价指标,对其温度、湿度、光线、空气中的氧气以及pH值等因素进行了考察,结果表明:衍生物对高温、高湿度、强光等均不稳定,对空气较敏感,在较强碱性的条件下也不稳定。在理化性质测定方面,将葛根素分子结构中的4’-酚羟基进行酰化后其理化性质发生了一定的变化。其中,衍生物熔点有所降低,旋光度值相对于葛根素有所增大,但都为右旋体,水中溶解度有所提高,脂/水分布系数增大,pKa值有一定的变化。说明经过结构修饰后的葛根素衍生物,与葛根素比较其水溶性和脂溶性都有一定的改善。抗心肌缺血的动物实验研究表明衍生物能明显对抗垂体后叶素所导致的大鼠心肌缺血;抗心率失常的动物实验发现衍生物能明显的对抗氯仿所致的小鼠心率失常;对高血脂症大鼠血液流变学的研究表明衍生物能显著改善急性高脂血症大鼠血液流变学的相关指标,以上三项研究都表明衍生物的作用均比葛根素的作用强或更显著。急性毒性实验的研究结果显示,通过对小鼠灌胃最大浓度的乳酸葛根素稠溶液和最大体积乳酸葛根素溶液后,观察小鼠的毒性反应,结果表明葛根素没有显著的毒性反应。综上所述,本论文基于葛根素分子结构所制备的衍生物乳酸葛根素,其理化性质、生物活性等方面均有一定程度的改善,达到了提高生物利用度,增强药理活性的目的,同时也为今后的制剂开发以及临床应用提供了一定的理论基础和数据支持。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 绪论
• 1.1 葛根素的药理、毒性研究
• 1.1.1 药理研究
• 1.1.2 毒性研究
• 1.2 临床应用研究
• 1.3 葛根素结构修饰及构效关系研究
• 1.3.1 药物化学结构与新药设计
• 1.3.2 有机药物的化学结构修饰
• 1.3.3 官能团对药效的影响
• 1.3.4 葛根素的结构修饰及构效关系研究
• 1.3.5 葛根异黄酮构效关系研究
• 1.4 葛根素的生物利用度及剂型研究
• 1.5 课题的提出、研究内容和意义
• 1.5.1 立题的依据
• 1.5.2 研究内容
• 1.5.3 研究意义
• 2 乳酸葛根素的制备研究
• 2.1 仪器与试药
• 2.1.1 仪器
• 2.1.2 主要试药
• 2.2 合成原理
• 2.3 工艺流程
• 2.4 制备方法
• 2.4.1 乳酸酰氯的制备
• 2.4.2 乳酸葛根素的制备
• 2.5 目标产物的分离纯化
• 2.5.1 TLC
• 2.5.2 柱层析
• 2.6 制备工艺优化
• 2.6.1 因素与水平选择
• 2.6.2 均匀设计表的选择及表头设计
• 2.6.3 实验方案及结果
• 2.6.4 实验结果分析
• 2.6.5 优化合成工艺的重复性实验
• 2.7 小结
• 3 葛根素及乳酸葛根素的结构表征
• 3.1 红外光谱（FI-IR）
• 3.2 紫外光谱（UV）
• 3.4 核磁共振（NMR）
• 3.5 元素分析
• 3.6 小结
• 4 乳酸葛根素的稳定性考察
• 4.1 评价指标的选择与评价方法的确定
• 4.1.1 薄层色谱鉴别方法建立
• 4.1.2 含量测定
• 4.2 影响因素的考察
• 4.2.1 高温试验
• 4.2.2 高湿试验
• 4.2.3 强光试验
• 4.2.4 不同pH 值的影响试验
• 4.2.5 空气中的氧的影响
• 4.3 小结
• 5 葛根素及乳酸葛根素的理化性质研究
• 5.1 熔点测定
• 5.2 比旋光度测定
• 5.3 水中溶解度的测定
• 5.3.1 线性关系的考察
• 5.3.2 水中溶解度的测定
• 5.4 pH 值对溶解度的影响
• 5.5 表观脂/水分布系数
• 5.6 不同释放介质中的溶解度
• 5.7 pKa 值
• 5.8 小结
• 6 乳酸葛根素的生物活性的初步研究
• 6.1 抗心肌缺血的动物实验研究
• 6.1.1 试液的配制
• 6.1.2 阳性对照溶液的配制
• 6.1.3 实验动物及检测仪器
• 6.1.4 试验方法与结果
• 6.2 抗心率失常的动物实验研究
• 6.2.1 实验材料
• 6.2.2 实验方法与结果
• 6.3 对高脂血症大鼠血液流变学的影响
• 6.3.1 实验材料
• 6.3.2 实验方法与结果
• 6.4 小结
• 7 急性毒性实验
• 7.1 试验目的
• 7.2 试验材料
• 7.2.1 受试药物的配制
• 7.2.2 实验动物的选择
• 7.3 试验的方法与结果
• 7.3.1 试验方法
• 7.3.2 试验结果
• 7.4 小结
• 8 结论与展望
• 8.1 结论
• 8.2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• A. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录