论文摘要
本论文设计了2类基因载体阳离子类脂,合成、提纯了计40个化合物,其中大部分为新化合物,全部产品经过IR,1H NMR,13C NMR,HRMS或MS表征结构正确,纯度符合转染要求。 所合成阳离子类脂可制成阳离子脂质体（囊泡）,采用TEM,动态光散射,及zeta-电位仪等手段对其进行研究,初步得到阳离子类脂及由其所制备出的阳离子脂质体的结构与性能的关系。所制备的阳离子脂质体可和DNA形成脂质体/DNA复合物。采用琼脂糖凝胶电泳的方法对脂质体/DNA复合物进行表征。 采用所制备的阳离子脂质体作为基因运载工具,转运质粒DNA pGL3-control对COS-7细胞株及Hep-2细胞株进行细胞转染实验,以2种商品化基因转染试剂Lipofectamine2000及Sofast进行对照,筛选出6个转染效率较高的阳离子脂质体。采用所筛选出来的6个基因载体阳离子脂质体转运质粒DNA pGL3-control在另外3种哺乳动物细胞株B16,MCF-7,Hepal-6中进行细胞转染校验实验:采用所筛选出来的6个基因载体阳离子脂质体转运质粒DNA pGFP-N2在5种细胞株COS-7,Hep-2,B16,MCF-7,Hepal-6中进行细胞转染校验实验,证实所筛选出的6个阳离子脂质体基因载体的转染效率高于或相当于2种商品化基因转染试剂。采用MTT方法对所筛选出的6个阳离子脂质体的细胞毒性进行了测量,证实所筛选出的6个阳离子脂质体基因载体的细胞毒性很低,具有作为基因载体的应用前景。 对阳离子类脂结构与转染效率的关系进行了分析,从疏水碳链长短,阳离子头部结构以及平衡阴离子等方面讨论,得出影响转染效率因素的一些初步性结论。
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摘要Abstract引言第一章 文献综述1.1 基因治疗概述1.1.1 基因载体概览1.2 脂质体概述1.3 脂质体在药物控释中的应用1.3.1 传统脂质体1.3.2 空间稳定化脂质体1.3.3 靶向脂质体1.4 脂质体在基因治疗中的应用1.4.1 阳离子脂质体1.5 前景展望第二章 阳离子类脂基因载体的设计与合成2.1 阳离子类脂基因载体的设计2.2 双醚键连接的阳离子类脂基因载体的合成2.2.1 结果与讨论2.2.2 实验部分2.3 双氨基甲酸酯键连接的阳离子类脂基因载体的合成2.3.1 结果与讨论2.3.2 实验部分本章附录：中间体及产品表征数据第三章 脂质体（囊泡）研究3.1 实验部分3.2 结果与讨论第四章 阳离子脂质体作为基因载体生物学实验研究4.1 生物学性能测试实验准备4.1.1 质粒DNA的扩增与分离4.1.2 细胞培养4.2 脂质体／DNA复合物研究4.2.1 脂质体／DNA复合物的制备4.2.2 琼脂糖凝胶电泳4.2.3 结果与讨论4.3 体外转染4.3.1 实验材料与方法4.3.2 细胞转染实验4.3.3 阳离子脂质体对其它质粒DNA的转染实验4.4 阳离子脂质体的细胞毒性试验4.4.1 实验仪器与方法4.4.2 结果与讨论第五章 靶向性阳离子类脂基因载体的设计与合成探索5.1 靶向性阳离子类脂基因载体的分子设计5.2 实验部分5.2.1 试剂5.2.2 化合物的合成5.2.3 讨论结论参考文献论文附录A：化合物表征谱图攻读博士学位期间发表学术论文情况创新点摘要致谢大连理工大学学位论文版权使用授权书
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