论文摘要
目的1、探索肾癌（肾透明细胞癌）细胞磁珠分选、原代培养及纯化实验的方法。2、分离肾癌干细胞并研究其一般生物学特性。方法采用机械和酶消结合的方法将新鲜肾癌组织制成细胞悬液，再采用等密度沉降分离法和反复贴壁法纯化肾癌细胞，然后将初步纯化的肾癌细胞采用CD133标记的免疫磁珠进行分选，对获得的CD133+和CD133-细胞进行体外实验，观察克隆形成和生长增殖能力；同时进行NOD／SCID鼠体内实验，观察这两种细胞的实验小鼠体内成瘤能力；研究肾癌细胞中CD133+和CD133-的生物学特性。结果1、肾癌细胞体外原代培养和纯化需要条件培养基进行培养；2、CD133-细胞在克隆形成和生长增殖能力方面明显强于CD133+细胞；在进行鼠体内成瘤实验的4例标本中CD133+、CD133-及分选前的细胞均未在NOD／SCID鼠体内成瘤。结论构成肾肿瘤的细胞成分复杂，纯化肾癌干细胞难度极大，通过反复摸索能够找出每个实验环节存在的问题并总结经验，为进一步研究奠定了基础。推测在CD133-细胞亚群体中可能存在肾癌干细胞。