重组脂联素在大鼠糖尿病肾病模型中的实验研究

论文摘要

目的:了解糖尿病肾病早期临床和病理的关系,寻找早期糖尿病肾病的指标,探讨脂联素在早期糖尿病肾病中可能的作用机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组和模型组。正常对照组（NC,n=9）喂养普通饲料,模型组以高糖高脂饲料喂养4周后,腹腔注射1%链脲佐菌素（STZ）30mg/Kg,48小时后血糖=16.7mmol/L为糖尿病模型。8周后测24小时尿蛋白,如24小时尿蛋白大于30mg/kg,即认为糖尿病肾病造模成功。将糖尿病肾病大鼠模型组再随机分为3组:糖尿病肾病组（DN组,n=6）,空载体转染组（DP组,n=6;腹腔注射脂质体+pIRES2-EGFP,200μg/次,每周两次）和脂联素转染组（DA组,n=6;腹腔注射脂质体+pIRES2-EGFP-gAd,200μg/次,每周两次）。分别于第5、6、7、8、10周末留尿测24小时尿蛋白、尿层粘连蛋白（LN）。10周后处死大鼠测尿素氮、肌酐、血糖,肾组织羟自由基、丙二醛（MDA）含量,光镜观察肾脏病理改变,免疫组化检测肾组织TGF-β1、LN。结果:1.与正常对照组比较,模型组各组大鼠体重明显降低（P＜0.01）,肾重/体重比明显增加（P＜0.01）;但模型组各组之间体重、肾重/体重比无明显差异（P＞0.05）。2.与正常对照组比较,糖尿病肾病组大鼠尿蛋白、尿层粘连蛋白水平均显著上升（P＜0.01）,且尿层粘连蛋白增加早于尿蛋白;模型组各组之间尿蛋白、尿层粘蛋白无明显差异（P＞0.05）。3.与正常对照组比较,模型组各组大鼠血糖明显升高（P＜0.01）;尿素氮、肌酐有所升高,但无统计学意义（P＞0.05）。DA组大鼠与DN、DP组大鼠比较,血糖降低具有统计学意义（P＜0.05）。4.与正常对照组比较,模型组各组大鼠肾组织抑制羟自由基能力降低（P＜0.01）,丙二醛增加（P＜0.05）;与DN、DP组大鼠比较,DA组大鼠肾组织抑制羟自由基能力升高,丙二醛减少,均有明显统计学意义（P＜0.05）。5.与正常对照组比较,模型组各组大鼠肾组织出现肾小球肥大,系膜基质增生,部分肾小管上皮细胞空泡变性、脱落,间质单核及淋巴细胞浸润。定量分析示模型组各组肾小球截面积、肾小球基质面积、肾小球基质面积/肾小球截面积均明显增加（P＜0.05）;模型组各组之间无统计学差异（P＞0.05）。6.模型组各组大鼠肾组织TGF-β1、LN表达均增加（P＜0.05）,在肾小管表达更明显。给予脂联素干预后,肾组织内TGF-β1、LN表达较DN、DP组有所减少,但无统计学意义（P＞0.05）。相关性分析示尿LN与肾脏LN呈正相关（r=0.739,P＜0.01）,肾脏TGF-β1和LN表达呈正相关（r=0.687,P＜0.01）。结论:1.糖尿病肾病大鼠尿层粘连蛋白增加早于尿蛋白,尿层粘连蛋白测定可能作为糖尿病肾病早期诊断指标之一。2.糖尿病肾病大鼠肾脏TGF-β1、LN表达增加,在肾小管表达更明显,LN的沉积可能与TGF-β1表达有关。LN在糖尿病肾病早期主要在肾小管表达,糖尿病肾病肾脏病理变化可能从肾小管开始。糖尿病肾病抑制羟自由基能力降低,丙二醛生成增加。糖尿病肾病氧化应激增加。3.脂联素干预糖尿病肾病大鼠,可抑制肾脏羟自由基产生,使脂质过氧化物生成减少,具有一定的抗氧化能力,对糖尿病肾病可能有一定的保护作用。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 第二章 结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的文章