PPARα的激动可能与小檗碱的降脂作用有关

论文摘要

目的:观察Ber对脂质代谢紊乱的防治作用,并探讨其降脂作用与PPARα之间的关系。方法:1.培养人肝癌细胞HepG2 ,给予不同浓度Ber(10-6mol/l、3×10-6mol/l、10-5mol/l、3×10-5mol/l、10-4mol/l、3×10-4mol/l),作用细胞24 h后应用RT-PCR观察对HepG2细胞PPARα及其调控基因CPTⅠA mRNA表达水平的影响,确定Ber作用的最佳浓度。然后用Ber最佳浓度作用HepG2细胞6 h、12 h、24 h、48 h和72 h后,应用RT-PCR观察对HepG2 CPTⅠA mRNA表达水平的影响,确定Ber最佳作用时间。2.培养人肝癌细胞HepG2,给予Ber(3×10-5mol/l) +或不+ MK886 (10-5mol/l)和FF(2×10-5mol/l)+或不+ MK886 (10-5mol/l)分别作用24 h后,采用RT-PCR检测各用药组细胞CPTⅠA mRNA表达水平。3.采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测各用药组细胞CPTⅠA蛋白表达水平。4.采用高脂加高胆固醇饲料,建立大鼠高脂模型。实验分5组:（1）对照组（普通饲料）;（2）模型组（高脂加高胆固醇饲料）;（3）Ber低剂量组（高脂加高胆固醇饲料+Ber 60 mg/kg）;（4）Ber高剂量组（高脂加高胆固醇饲料+ Ber 300 mg/kg ）;（5）洛伐他汀组（高脂加高胆固醇饲料+70 mg/kg）。每组各8只大鼠。20周后尾部采血,用全自动生化分析仪测定血清胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）,确定高脂模型建立,观察各组药物对大鼠血脂变化的影响。5.采用RT-PCR检测各组动物肝脏PPARα和CPTⅠA mRNA表达水平。6.采用Western blot检测各组动物CPTⅠA蛋白表达水平。结果:1. Ber显著呈浓度和时间依赖性促进CPTⅠA mRNA的表达,但是对PPARαmRNA表达没有显著影响。2. Ber(3×10-5 mol/l)对CPTⅠA mRNA和蛋白表达有明显促进作用（P<0.01）;PPARα特异激动剂FF(2×10-5 mol/l)也明显促进CPTⅠA mRNA和蛋白表达（P<0.01）;PPARα特异拮抗剂MK-886预处理细胞后阻断了FF和Ber上述作用。3. Ber 60 mg/kg和300 mg/kg每天给予明显降低高脂大鼠血浆TC、TG和LDL-C水平;其作用与洛伐他汀无显著差异。4. Ber高、低剂量组明显促进HepG2 CPTⅠA mRNA和蛋白表达;但并不明显影响PPARαmRNA和蛋白表达;洛伐他汀对HepG2的PPARα和CPTⅠA mRNA和蛋白表达无明显影响。结论:Ber能显著降低高脂血症大鼠血浆TC和LDL水平;其作用原理可能与激动PPARα,由此促进以CPTⅠA为代表的,受PPARα调控的,涉及脂质代谢的基因表达有关。

论文目录

• 英汉缩略语名词对照
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 小檗碱对HepG2细胞PPARα及其调控基因CPTⅠA表达的影响
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第二部分 小檗碱对高脂模型大鼠的降脂作用及其机制研究
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 全文结论
• 参考文献
• 文献综述
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文