凋亡在丙烯酰胺亚慢性染毒诱导的中毒性神经病中的初步研究

论文摘要

目的 为阐明凋亡在丙烯酰胺引起的中毒性神经病中的作用,我们建立了大鼠丙烯酰胺亚慢性中毒模型,通过测定大鼠染毒后中枢和周围神经系统组织中bcl-2、bax和caspase-3表达的变化以及核DNA的改变,探讨凋亡相关的分子调控机制在丙烯酰胺毒性机制中的作用,为研究丙烯酰胺诱导的中毒性神经病的发病机制提供依据。 方法 1.建立动物模型 选用雄性成年Wistar大鼠分别以20mg/kg体重和40mg/kg体重剂量腹腔注射染毒,每周3次,连续2个月。 2.神经行为指标测定 密切观察各组大鼠一般状况的变化,每周测量大鼠体重、热觉传导、压痛阈值、后肢撑力、转棒等指标。 3.神经细胞凋亡的相关检测 1) 形态学检测 通过对大鼠大脑皮质、小脑和脊髓石蜡切片的HE染色,观察是否存在细胞凋亡或/和坏死的形态学变化。 2) TUNEL法检测 通过对大鼠大脑皮质、小脑和脊髓石蜡切片的TUNEL检测,确定是否存在核DNA的裂解和细胞凋亡的形态学改变。 3) 凋亡相关蛋白和酶的检测通过免疫组织化学方法测定大脑皮质、小脑和脊髓石蜡切片中Bcl-2和Bax免疫活性的变化;通过Western blotting测定大脑皮质、小脑、脊髓和坐骨神经中bcl-2、bax和caspase-3表达的变化。 4) DNA Ladder的检测 测定大脑皮质、小脑和脊髓提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳是否存在DNA Ladder,来确定是否存在特征性的180～200bp的DNA裂解片段。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 前言
• 材料和方法
• 神经行为学指标测定
• 苏木素-伊红染色
• TUNEL检测
• 蛋白质印迹法
• 免疫组织化学检测
• DNA琼脂糖凝胶电泳
• 结果
• 一般毒性、体重的影响
• 神经行为功能的影响
• 形态学观察结果
• Bcl-2、Bax免疫活性的改变
• Bcl-2、bax和caspase-3表达的改变
• TUNEL检测结果
• 琼脂糖凝胶电泳的结果
• 讨论
• 丙烯酰胺对大鼠神经行为功能的影响
• 丙烯酰胺对bcl-2、bax和caspase-3表达的影响
• 丙烯酰胺引起的组织特异性的凋亡改变
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的论文
• 学位论文评阅及答辩情况表