论文摘要
神经降压素是由13个氨基酸残基组成的生物活性多肽,具有多重生理功能,且高活性、作用快速,可作为潜在的安定药、镇痛药和降压药等,具有广阔的应用前景。本研究主要进行了固相合成反应器的设计及合成工艺的优化。首先对手工固相合成仪（反应器）进行了设计、选择及优化,确定以振荡混合型反应器为本研究的最佳固相合成反应器。然后选择以Fmoc保护的氨基酸为原料,Wang树脂为载体,按照神经降压素的氨基酸序列Pyr-Leu-Tyr-Glu-Gln-Lys-Pro-Arg-Arg-Pro-Tyr-Ile-Leu-OH,从C端向N端进行合成,成功合成了神经降压素。考察了缩合试剂、脱保护试剂、切割试剂等条件对合成效果的影响,确定了优化的合成工艺:以DCM为反应溶剂,TBTU/HOBt/DIEA为缩合剂,采用TFA/H2O/thioanisole/Phenol/EDT（82:5:5:6:2）的切割试剂的配方的切割条件,保护氨基酸2倍过量进行缩合反应,反应时间为3～12h。反应结果使神经降压素的收率达61.8%。此合成工艺操作简单、周期短、合成效率高、成本低、适合于规模化生产。建立了合成神经降压素粗产品的HPLC分析方法,研究了乙腈浓度梯度、乙腈起始浓度对分析效果的影响,并进行了神经降压素粗产品的LC/MS分析,检测分子量为1672.96,结果验证了合成的多肽为神经降压素。
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