论文摘要
油菜是最重要的油料作物之一,也是我国的主要经济作物,在国民经济中占有重要地位。其油主要食用,其饼粕主要用于饲料。近年来人们对油菜的品质不断改良,并且菜籽油也大量应用于化工、能源领域,转基因油菜也用来生产生物柴油的原料等。由于油菜用途的不断拓展,对其研究也不断深入。近年来,利用基因工程手段,提高种子的含油量,增加其经济价值,成为研究的重要目标。丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制PEP基因的表达,可提高种子的含油量。本研究利用PCR法从甘蓝型油菜花油5号(H045)克隆了PEP基因片段,与种子特异性表达载体pBI121-B构建了反义PEP基因的种子特异性植物表达载体,;并以甘蓝型油菜花油5号(H045)为材料,利用激光微束穿刺法将其转化到甘蓝型油菜中,通过卡那抗性和PCR方法鉴定,获得了转基因植株。本研究利用激光微束穿刺法将外源基因成功导入油菜中,克服了油菜农杆菌转化存在的众多问题,诸如转化频率低,重演性差,基因型限制等,这为通过基因工程新技术,大幅度提高油菜种子的含油量提供了一个新途径,丰富了油菜高油育种理论。
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