食管癌核基质与p16基因上游序列的相关性研究

论文摘要

核基质是由Berezney和Cofey于1974年首次提出的，它是核酸的骨架结构。是经核酸酶消化及高盐抽提等处理依次去除细胞核脂质，可溶性组蛋白以及染色质后的独立的残余亚核结构，它作为细胞核的支架结构，在DNA的复制、转录、修复及RNA合成、剪切、运输等方面起着重要作用。近年来的研究发现，组织细胞不同，核基质蛋白成分有一定的差别，与正常细胞相比，肿瘤细胞中亦有特异性核基质蛋白成分存在。核基质蛋白具有明显的组织和细胞特异性。在研究肿瘤发病机制及寻找肿瘤标记物方面，肿瘤相关的核基质的分离和确定已成为一种新的方法和途径。迄今，已在肝癌，结肠癌，前列腺癌及乳腺癌等组织中分离确定了特异性的核基质。一些已应用于临床的诊断和治疗（例如：NMP22，NMP66）。食管癌的早期诊断的新型肿瘤标志物尚未发现。p16基因低表达见于包括食管癌在内的多种肿瘤组织中。p16基因只有与核基质结合，才能转录mRNA，进而表达p16蛋白起作用，而食管癌核基质与p16基因，尤其是与p16基因上游序列调控区作用的相关性分析目前尚未报道。目的：研究p16基因上游序列与食管癌组织核基质蛋白特异结合的相关性。旨在探讨食管癌发病的机制。方法：应用质粒转化，目的DNA片段回收，DNA探针的制备，SDS-PAGE技术和Southwestern杂交技术，对24例食管癌组织、癌旁组织（癌旁组织距癌灶＞3.0cm）及正常组织的核基质蛋白进行研究。用UVPtool软件进行定量分析。结果：SDS-PAGE显示：与正常组织比较，食管癌组织28kD的核基质蛋白表达量明显减少（P＜0.05）；Southwestern blot显示：正常组织核基质蛋白与p16基因上游序列的结合主带为20kD、31kD、43kD，食管癌组织则为50kD～66kD。食管癌组织与正常组织比较，54kD结合阳性信号明显增强（P＜0.05）；而不同分化阶段的癌组织相比54kD结合阳性信号无显著性差异。结论：食管癌组织中核基质蛋白的改变及54kD蛋白与p16基因上游区异常结合可能与食管癌发生有关。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 论文部分 食管癌核基质与p16基因上游序列的相关性研究
• 引言
• 材料与方法
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述部分 核基质蛋白在肿瘤发生中作用
• 参考文献
• 英文缩写词
• 硕士期间发表论文
• 致谢