论文摘要
目的通过对新生小鼠兴奋毒性脑损伤模型神经行为的检测,以期找到一种适合兴奋毒性脑损伤模型的、可重复的、标准化的早期和远期神经功能检测方法,为围生期脑损伤神经保护的研究索新的实验方法。方法选取不同窝别、生后5天(Postnatal 5,P5)的ICR种新生小鼠61只,随机分为空白对照组、生理盐水对照组和实验组,用Ibotenate建立兴奋毒性脑损伤模型。模型建立后进行平面翻正实验(P6、P7、P8、P9、P10)、游泳实验(P8、P10、P12)、旷场实验(P30、P31、P32)、Y-迷宫分辨学习实验(P33、P34)的行为学检测,观察行为改变,并监测体重变化。行为学实验采取双盲法进行。生理盐水对照组和实验组小鼠于P34处死取脑组织进行组织切片,H-E染色,观察其脑损伤情况,计算脑损伤直径。结果1.体重变化除P5和P6体重外,实验组小鼠体重明显低于对照组(P<0.05),而空白对照组和生理盐水对照组之间没有显著性差异(P>0.05);2.平面翻正实验P6至P10实验组小鼠翻正反射时间分别为2.12±0.61、1.86±0.65、1.50±0.51、1.28±0.29、1.01±0.15,明显长于对照组(P<0.05),空白对照组和生理盐水对照组之间平面翻正反射时间没有显著性差异(P>0.05);实验组平面翻正反射成绩随着年龄的增长越来越接近于对照组;3.游泳实验P8、P10、P12实验组游泳实验评分分别为6.33±0.98、6.87±0.74、7.13±0.64,明显低于对照组(P<0.05),空白对照组和生理盐水对照组之间比较没有显著性差异(P>0.05);实验组游泳实验评分随着年龄的增长越来越接近于对照组;在分项评分中,各组之间四肢运动评分比较差异无显著性(P>0.05),且P10和P12四肢运动评分为2.00分;P10实验组方向评分为2.40±0.51,明显低于对照组(F=12.414,P=0.000),空白对照组和生理盐水对照组之间比较没有显著性差异(P>0.05),各组之间P8、P12方向评分比较差异无显著性(P>0.05);实验组P8、P10、P12角度评分分别为2.27±0.46、2.53±0.52、2.53±0.52,明显低于对照组(P<0.05),空白对照组和生理盐水对照组之间比较没有显著性差异(P>0.05),且P12角度评分均为3.00分;4.旷场实验实验组与对照组相比,除P30修饰行为有显著性差异外(F=4.179,P=0.021),其余实验结果之间均没有显著性差异(P>0.05);空白对照组与生理盐水对照组之间没有显著性差异(P>0.05);5.Y-迷宫分辨学习实验实验组“学会”所需次数为19.79±2.42,明显多于对照组(F=10.477,P=0.000),空白对照组和生理盐水对照组“学会”所需次数之间没有显著性差异(P>0.05);实验组正确反应率为86.67%,空白对照组与生理盐水对照组分别为96.5%、95%,实验组记忆正确反应率明显低于对照组(x2=14.703,P=0.001),空白对照组和生理盐水对照组之间记忆成绩没有显著性差异(x2=0.553,P=0.311);6.脑损伤病理组织学评估实验组组织切片可观察到右侧脑白质区囊性病变的形成和海马区损伤,囊性病变直径1008.00μm(P25=816.00μm,P75=1152.00μm),生理盐水对照组没有观察到脑白质区的损伤;7.行为改变和脑组织病理损伤直径相关性分析P10平面翻正实验结果与脑组织病理损伤直径之间有相关性(r=0.609,P=0.016),P6、P7、P8、P9平面翻正实验结果与脑损伤直径之间没有相关性;P8游泳实验评分和脑组织病理损伤直径之间有相关性(r=0.602,P=0.017),P10、P12游泳实验评分与脑组织病理损伤直径之间没有相关性;学习、记忆成绩和脑组织病理损伤直径之间没有相关性。结论1.小鼠兴奋毒性脑损伤后早期发育反射行为和远期学习记忆功能都受到损伤;2.平面翻正实验、游泳实验和Y-迷宫分辨学习实验可作为小鼠兴奋毒性脑损伤模型早期发育反射和远期行为改变的研究的方法,旷场实验则对该模型没有意义;3.兴奋毒性脑损伤模型P10平面翻正反射结果和P8游泳实验结果对远期脑损伤程度有可预测性。
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