艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体氧化损伤影响的实验研究

论文摘要

目的为进一步深入探讨艾灸延缓衰老机理,以D-半乳糖致衰老大鼠为研究对象,以中医衰老理论为指导,以现代衰老松果体学说为切入点,通过观察艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体中SODmRNA表达、HSP70表达、LF含量、松果体细胞数的影响,探讨了艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体氧化损伤的干预作用,从分子转录及表达水平深入揭示艾灸延缓衰老机理,为艾灸延缓衰老应用于临床提供新的实验依据。方法实验大鼠随机分为空白组、模型组、模型+艾灸组,空白组每日颈部皮下注射生理盐水1次,模型组每日颈部皮下注射D-半乳糖溶液1次,模型+艾灸组在每日颈部皮下注射D-半乳糖溶液后,选用双侧脾俞、肾俞进行艾灸治疗,连续治疗6周,6周结束时,采集松果体,经固定、包埋、组织切片处理后,采用原位杂交技术、多克隆抗体免疫组化技术及组织化学染色技术,分别测定各组大鼠松果体SODmRNA表达、HSP70表达、LF含量、松果体细胞数,应用病理图文图像分析系统及细胞医学图像分析系统对结果进行图像采集及分析处理。结果1与空白组相比,模型组大鼠松果体中SODmRNA及HSP70表达显著降低（P＜0.001,P＜0.01）、LF明显含量增加（P＜0.001）、松果体细胞数显著减少（P＜0.001）。2与模型组相比,模灸组大鼠松果体中SODmRNA及HSP70表达显著增加（P＜0.01,P＜0.05）、LF含量显著减少（P＜0.001）、松果体细胞数显著增多（P＜0.01）。结论1艾灸可以在分子转录、表达水平上影响机体衰老过程中松果体的氧化损伤,其可能的作用机理是:艾灸通过减缓LF在松果体中沉积,上调松果体中SODmRNA及HSP70的表达而干预松果体的氧化损伤,进而延缓松果体衰退进程。2艾灸通过对松果体氧化损伤的干预作用,减缓机体衰老过程中松果体细胞减少的速度,在一定程度上维持松果体的正常形态及功能,从而延缓松果体衰老。这可能是艾灸延缓衰老的又一作用机理。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 主要英文缩略词表
• 引言
• 第一部分 D-半乳糖致衰老大鼠模型的建立
• 1 实验材料
• 1.1 动物的选择
• 1.2 主要试剂与仪器
• 2 实验方法
• 2.1 实验分组
• 2.2 D-半乳糖溶液的配制
• 2.3 建立D-半乳糖致衰老大鼠模型
• 2.4 采集标本
• 2.5 观察指标及检测方法
• 3 统计学方法
• 4 结果与分析
• 4.1 各组大鼠的一般状况
• 4.2 两组大鼠血清SOD活性比较
• 4.3 两组大鼠血清MDA含量比较
• 第二部分 艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体氧化损伤的影响
• 实验一 艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体中LF含量的影响
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验试剂及器材
• 2 实验方法
• 2.1 实验分组
• 2.2 模型制作
• 2.3 治疗方法
• 2.4 采集标本
• 2.5 观察指标及检测方法
• 2.6 图文图像分析
• 3 统计学方法
• 4 结果与分析
• 4.1 各组大鼠的一般状况
• 4.2 形态学观察
• 4.3 各组大鼠松果体LF平均光密度比较
• 实验二 艾灸对D-半乳糖松果体SODmRNA表达的影响
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂与仪器
• 2 实验方法
• 2.1 实验分组
• 2.2 模型制作
• 2.3 治疗方法
• 2.4 采集标本
• 2.5 SODmRNA表达的检测及结果判断
• 2.6 图像定量分析
• 3 统计学方法
• 4 结果与分析
• 4.1 形态学观察
• 4.2 各组大鼠松果体SODmRNA表达的平均光密度比较
• 实验三 艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体中HSP70表达的影响
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验试剂及器材
• 2 实验方法
• 2.1 实验分组
• 2.2 模型制作
• 2.3 治疗方法
• 2.4 采集标本
• 2.5 HSP70表达的检测及结果判断
• 2.6 图文图像分析
• 3 统计学方法
• 4 结果与分析
• 4.1 形态学观察
• 4.2 各组大鼠松果体HSP70表达的平均光密度比较
• 实验四 艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体中松果体细胞数的影响
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验试剂及器材
• 2 实验方法
• 2.1 实验分组
• 2.2 模型制作
• 2.3 治疗方法
• 2.4 采集标本
• 2.5 松果体细胞数检测
• 2.6 松果体细胞计数
• 3 统计学方法
• 4 结果与分析
• 4.1 形态学观察
• 4.2 各组大鼠松果体细胞数比较
• 讨论
• 1 关于衰老动物模型的选用
• 1.1 常用制备衰老动物模型
• 1.2 关于D-半乳糖亚急性衰老动物模型
• 2 现代医学对衰老的认识
• 3 关于选取松果体为研究对象的依据
• 3.1 松果体的位置形态及MT的合成
• 3.2 松果体的高级调节功能
• 3.3 松果体及MT的延缓衰老作用
• 3.4 关于"衰老的松果体学说"
• 4 关于自由基对细胞的氧化损伤作用
• 5 祖国医学对衰老的认识
• 5.1 祖国医学关于衰老的描述
• 5.2 历代中医对衰老机理的认识
• 5.3 关于"脾肾两虚夹瘀致衰老学说"
• 6 艾灸疗法在延缓衰老方面的优势
• 7 关于穴位的选择
• 8 艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体中LF含量影响的机制探讨
• 9 艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体中SODmRNA表达影响的机制探讨
• 10 艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体中HSP70表达影响的机制探讨
• 11 艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠松果体细胞数影响的机制探讨
• 结论
• 问题与展望
• 致谢
• 参考文献
• 综述一
• 综述二
• 在校期间公开发表的学术论文、专著及科研成果