论文摘要
目的:探索CTLA4-Ig 联合供体骨髓细胞输注能否诱导耐受,两者联合有无协同作用,并分析诱导耐受的机理,旨在找到一种诱导耐受的新方法,为临床应用提供实验依据。方法: 一、建立小鼠腹部异位心脏移植模型。实验动物为SPF 级近交系小鼠,在放大16 倍手术显微镜下操作,乙醚吸入、2%水合卤醛腹腔注射麻醉。供体心脏仅保留升主动脉和肺动脉,其他血管一并结扎。用11-0 带线缝合针将供心主动脉与受体腹主动脉、供心肺动脉与受体下腔静脉端侧缝合。供心血液循环途径:受体腹主动脉→移植心主动脉→移植心冠状动脉→移植心冠状静脉→移植心右心房→移植心右心室→移植心肺动脉→受体下腔静脉。二、动物分组。先将实验动物分组,然后进行心脏移植手术。术中通过门静脉注射供体骨髓细胞或PBS,术后48 小时内腹腔注射CTLA4-Ig 或PBS。共分四组如下: A 组:对照组心脏移植后即通过门静脉属支注射PBS 1.0ml ,48 小时后腹腔注射PBS 0.3ml ,共14 只。B 组:应用CTLA4-Ig 组心脏移植后即通过门静脉属支注射PBS 1.0ml ,48 小时后腹腔注射CTLA4-Ig 0.15mg (0.3ml 稀释液,用PBS 稀释),共14 只。C 组:输注供体骨髓细胞组心脏移植后即通过门静脉属支注射供体骨髓细胞3×107个(1.0ml),48 小时后腹腔注射PBS 0.3ml ,共14 只。D 组:CTLA4-Ig 联合供体骨髓细胞输注组心脏移植后即通过门静脉属支注射供体骨髓细胞3×107个(1.0ml),48 小时后,腹腔注射CTLA4-Ig 0.15mg (0.3ml 稀释液,用PBS 稀释),共14 只。三、术后观察记录结果。1、术后每日经腹壁触摸移植心脏的跳动情况,以跳动与否作为移植心是否遭排斥的指标,计算移植心存活天数。
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