内蒙古牛皮蝇蛆病最佳防治时机及诊断方法研究

论文摘要

本课题旨在建立有效控制牛皮蝇蛆病在内蒙古地区的流行的科学防治时机及免疫学诊断方法,本研究在牛皮蝇成蝇季节动态调查和幼虫移行规律研究的基础上,确定了内蒙古地区牛皮蝇蛆病的最佳防治时机;为了实现早期诊断和把握防治时机,分别以虫体粗蛋白和重组蛋白为抗原,建立了牛皮蝇蛆病的ELISA诊断方法。防治时机的研究:内蒙古地区牛皮蝇蛆病为纹皮蝇和牛皮蝇混合感染,两者比例为4.1:1,纹皮蝇为优势蝇种。在内蒙古西部呼和浩特市周围农牧交错区纹皮蝇Ⅰ期幼虫在8月下旬开始进入牛食道部,在9月中旬～10月上旬寄生数量达到高峰,12月初纹皮蝇幼虫完全离开食道向背部移行,在牛背部发育为Ⅲ期幼虫,形成“瘤包”。纹皮蝇Ⅲ期幼虫在4月上旬落地,到5月底～6月初成蝇开始出现,6月末成蝇基本消失。牛皮蝇的出没要比纹皮蝇晚15天左右;在东部北方牧区,皮蝇的活动规律与西部基本相似,只是出没时间较西部晚约半个月。根据牛皮蝇的季节动态和幼虫移行规律,确定了内蒙古西部农牧交错区牛皮蝇蛆病的主要防治时机为7月中旬～8月中旬,辅助防治时机为1月中旬～2月中旬;在东部牧区牛皮蝇蛆病的主要防治时机为8月初～9月初,辅助防治时机为2月初～3月初。诊断方法的建立:分别以虫体粗蛋白和重组rHC蛋白为检测抗原建立了牛皮蝇蛆病的ELISA诊断方法。两种抗原的包被浓度分别为26.64μg/ml和15.63μg/ml,均具有较好的特异性和敏感性,虫体抗原的特异性和敏感性分别为100%和98.36%,重组抗原的特异性和敏感性分别为95.8%和100%。用建立的两种ELISA诊断方法检测采自内蒙古地区的233份田间血清,结果显示两种抗原ELISA检测方法间差异不显著(p>0.05)。在次年以传统诊断方法进行复检,两种诊断方法均有很好的阳性符合率(分别为88.46%和93.75%),说明两种抗原建立的ELISA诊断方法均可用于牛皮蝇蛆病的诊断。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 牛皮蝇蛆病的地理分布及流行情况
• 1.2 牛皮蝇蛆病的危害
• 1.3 牛皮蝇蛆病的流行病学调查
• 1.3.1 牛皮蝇的生物学特性
• 1.3.2 牛皮蝇蛆病防治时机的研究
• 1.4 国内外防治牛皮蝇蛆病的研究情况
• 1.4.1 国外防治牛皮蝇蛆病的历史进程
• 1.4.2 我国防治牛皮蝇蛆病的历史进程
• 1.5 牛皮蝇蛆病诊断方法的研究
• 1.5.1 根据流行病学和临床症状
• 1.5.2 血清学诊断
• 1.6 研究的目的和意义
• 2 试验研究一 内蒙古自治区牛皮蝇蛆病防治时机的研究
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 研究对象
• 2.1.2 实验地点
• 2.1.3 实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 感染率及感染强度的调查
• 2.2.2 优势蝇种的调查
• 2.2.3 幼虫移行规律研究
• 2.2.4 成蝇出没时间的研究
• 2.2.5 防治时机的研究
• 2.3 实验结果
• 2.3.1 感染率和感染强度
• 2.3.2 优势蝇种
• 2.3.3 幼虫移行规律
• 2.3.4 成蝇出没时间
• 2.3.5 防治时机的研究
• 2.3.5.1 西部农牧交错区防治时机
• 2.3.5.2 东部牧区防治时机
• 2.4 讨论
• 3 试验研究二 牛皮蝇蛆病间接 ELISA 诊断方法的初步建立和应用
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 虫体材料
• 3.1.2 实验仪器
• 3.1.3 试剂
• 3.1.4 试剂的配制
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 抗原、抗体的制备
• 3.2.2 虫体粗抗原蛋白浓度测定
• 3.2.3 间接 ELISA 的实验程序
• 3.2.4 间接 ELISA 最佳工作条件
• 3.2.5 判定点确立
• 3.2.6 特异性及敏感性测定
• 3.2.7 抗原阻断试验
• 3.2.8 重复性试验
• 3.2.9 田间血清学检测
• 3.2.10 阳性符合率试验
• 3.3 结果
• 3.3.1 虫体抗原浓度测定
• 3.3.2 间接 ELISA 最佳工作条件
• 3.3.3 判定点确立
• 3.3.4 特异性和敏感性测定
• 3.3.5 抗原阻断试验
• 3.3.6 重复性试验
• 3.3.7 田间血清学检测
• 3.3.8 阳性符合率试验
• 3.4 讨论
• 4 研究结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 作者简介