间歇性无氧游泳训练大鼠血睾酮降低的Leydig细胞胆固醇代谢机制研究

论文摘要

纵观运动性血睾酮降低的动物实验报道,在训练的安排中,多未明确训练属于有氧还是无氧;对于造成的运动性血睾酮降低状态,多未指出其属于生理性还是病理性;在Leydig细胞水平的机制研究中,对LH/CG受体、β2-肾上腺素受体、StAR蛋白、胆固醇侧链裂解酶等环节的改变均有报道,而对睾酮生成的初始原料胆固醇代谢变化的研究所见甚少。本研究针对上述问题开展了如下实验:一、确定运动负荷。通过乳酸最小试验,确定4.5%体重的负重是雄性SD大鼠游泳运动时的最大乳酸稳态负荷,对应血乳酸为10.4±2.5mmol/l,提示负重大于4.5%体重的游泳血乳酸将会堆积。二、建立间歇性无氧训练下大鼠血睾酮降低模型。大鼠进行5%负重的间歇游泳训练五周（游泳5分钟-休息1分钟,6组/日,6次/周）。末次训练后第24小时、48小时和1周末,分批宰杀训练大鼠与对照大鼠,检测血睾酮（T）、皮质酮（C）、肌酸激酶（CK）、血尿素（BU）,观察心、肝、肾等脏器组织形态学的变化。结果显示:五周训练导致血T显著降低,血CK、BU显著升高,心、肝、肾组织出现病理性变化,睾丸组织未出现病理性变化。一周停训后,血T、CK、BU变化以及心、肝、肾组织的病理性变化均未完全回复。三、运动性血睾酮降低大鼠Leydig细胞胆固醇代谢变化。大鼠训练、宰杀同前,检测血T、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇酯（HDL-CE）、低密度脂蛋白胆固醇酯（LDL-CE）,血白细胞的低密度脂蛋白受体（LDL-R）和清道夫受体（SR-BI）、Leydig细胞的HMG-CoA还原酶、LDL-R、SR-BI和StAR基因的mRNA表达。结果显示:五周训练后血T显著降低时, Leydig细胞LDL-R mRNA表达显著增加,SR-BI和HMG-CoA还原酶、StARmRNA表达无明显变化。一周停训后,血T回复但仍处于较低水平,血HDL-CE显著升高,Leydig细胞SR-BI mRNA表达量也显著增加,其余指标均无明显变化。四、运动性血睾酮降低发生、发展过程的研究。在运动性血T降低（TA组）的基础上,大鼠停训一周（TC组）,大鼠继续训练一周:负荷不变（TD组）、负荷量加倍（5%体重的负重,2组/日,TE组）或强度增加（6%体重的负重,1组/日, TF组）,并与同龄血T正常的不训练大鼠（Sc组）或训练一周大鼠（TG组）进行比较。结果显示:TD组,血睾酮进一步降低,Leydig细胞LDL-R mRNA表达出现显著降低;TF组,血T进一步降低,Leydig细胞LDL-R、SR-BI、HMG-CoA还原酶的mRNA表达量出现显著性降低;TE组,血T进一步、显著性降低,Leydig细胞LDL-R、SR-BI、HMG-CoA还原酶以及StAR的mRNA表达量均发生显著性降低。另外,TD、TE、TF组的心、肝、肾和睾丸组织均发生了不同程度的病理性变化。相比之下,TG组只出现了血T降低,影响Leydig细胞胆固醇代谢的关键环节均未出现变化,同时大鼠心、肝、肾、睾丸组织器官均未发生显著的病理性变化。血白细胞的LDL-R mRNA的表达量随运动负荷增加而显著降低, SR-BI mRNA表达量则随运动负荷的增加有升高的趋势。结论:（1）间歇性无氧游泳训练1周能导致大鼠血睾酮降低,但心、肝、肾、睾丸组织的形态学不会发生改变;训练5周引起血T持续降低并伴有心、肝、肾重要脏器的病理性变化,此时睾丸组织未发生病理性变化;训练5周后停训一周、血T恢复过程中,重要脏器病理变化亦有所缓解;对运动性低血T大鼠强化训练,重要脏器病理变化加剧,睾丸的组织形态也发生了病理性变化。显然,伴随有重要脏器的病理性变化的运动性血T降低,应属病理性的变化。（2） 1周间歇性无氧游泳训练,Leydig细胞胆固醇代谢的关键步骤不受影响;5周间歇性游泳训练,Leydig细胞首先通过加强LDL-R介导的内吞作用加强自身摄取胞外胆固醇的能力;停训一周后,SR-BI介导的胆固醇选择性摄取途径加强;对运动性低血T大鼠强化训练,将引起Leydig细胞内胆固醇的合成、摄取与转运等关键步骤的抑制。（3） Leydig细胞内胆固醇代谢关键环节的障碍不一定是导致运动性血睾酮降低的起始原因,但细胞内HMG-CoA还原酶、LDL-R、SR-BI、StAR mRNA表达量的降低会加速运动引起的血睾酮降低。（4）在运动性血睾酮降低发生、发展过程中,LDL-R mRNA在Leydig细胞与白细胞的表达量在变化趋势上有相似之处,能否利用白细胞的LDL-R、SR-BI mRNA表达量间接反映Leydig细胞摄取外源性胆固醇的功能状态,尚有待进一步研究。

论文目录

• 缩略语中英文对照
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 文献综述
• 1. 运动引起睾酮降低发生机制的研究现状
• 1.1 睾丸Leydig 细胞合成、分泌睾酮机能的变化
• 1.2 睾丸之外调节睾酮合成、分泌的影响因素的研究
• 2. 运动、睾酮与脂代谢
• 2.1 运动与脂代谢
• 2.1.1 运动与低密度脂蛋白受体
• 2.1.2 运动与清道夫受体
• 2.1.3 运动与血浆脂蛋白
• 2.2 睾酮与脂代谢
• 2.3 胆固醇代谢与运动性血睾酮降低
• 2.3.1 睾丸LEYDIG 细胞内胆固醇的生物合成
• 2.3.2 睾丸LEYDIG 细胞对细胞外胆固醇的选择性摄取
• 2.3.3 运动对睾丸LEYDIG 细胞胆固醇代谢的影响
• 3 实时荧光定量PCR 检测技术
• 选题依据
• 研究内容
• 1 研究思路与实验总体设计
• 2 乳酸最小试验
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 实验动物与饲养条件
• 2.1.2 运动方案
• 2.1.3 测试方法
• 2.1.4 数据处理与统计
• 2.2 实验结果
• 2.2.1 大鼠6 分钟间歇游泳运动后恢复期血乳酸的动态变化
• 2.2.2 实验大鼠在递增负荷游泳运动中血乳酸的动态变化
• 2.3 分析与讨论
• 2.4 小结
• 3 造模实验
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 实验动物与饲养条件
• 3.1.2 动物分组
• 3.1.3 运动方案
• 3.1.4 动物宰杀与取材
• 3.1.5 测试指标与方法
• 3.1.6 数据处理与统计
• 3.2 实验结果
• 3.2.1 实验大鼠的一般情况
• 3.2.2 大鼠血清CK、BU 浓度的变化
• 3.2.3 大鼠血清睾酮、皮质酮浓度的变化
• 3.2.4 组织形态观察
• 3.3 分析与讨论
• 3.4 小结
• 4 运动性血睾酮降低发生机理的研究
• 4.1 实验一
• 4.1.1 材料与方法
• 4.1.2 实验结果
• 4.1.3 分析讨论
• 4.1.4 小结
• 4.2 实验二
• 4.2.1 材料与方法
• 4.2.2 实验结果
• 4.2.3 分析与讨论
• 4.2.4 小结
• 5. 全文总结
• 本研究创新点
• 致谢
• 个人简历
• 参考文献
• 附件