红汁乳菇深层培养及多糖分离提取工艺的研究

论文摘要

红汁乳菇是红菇科乳菇属真菌，主要分布于我国和日本等地。因其味道鲜美脆嫩，营养丰富，可食用也可药用，在各地市场十分走俏，是分布区内十分著名的珍贵食用菌。它与马尾松共生，是一种菌根食用菌，因其有特殊的生态条件、营养方式和子实体分化条件，目前尚不能人工栽培。市场供应全靠野生采集，由于野生红汁乳菇过度采摘，导致产地自然资源严重破坏，产量逐渐减少。为了保护食用菌资源多样性和满足消费者对食用菌的需求，运用深层培养技术培养红汁乳菇等食用菌根菌成为目前国内外研究的热点。本论文对野生红汁乳菇的菌种分离、菌丝纯培养、菌丝的深层培养条件、子实体和菌丝体的营养成分分析及多糖的提取分离工艺进行了研究。主要研究结果如下：1．本实验选用给定PDA培养基，运用组织分离和孢子分离法都成功分离得到了红汁乳菇菌种。2．对红汁乳菇子实体和菌丝体的营养成分进行测定分析，结果表明其子实体和菌丝体的各种成分均相差不大。3．利用响应曲面法对红汁乳菇菌丝体的深层培养条件和多糖的提取工艺进行了优化。结果表明：当深层培养条件为麦芽糖40.09g／L、蛋白胨3.35 g／L、K2HPO41.98 g／L、培养温度30.04℃时，可获得最大菌丝产量为13.17 g／L；料液比为1：35.2，在39.5℃下提取34.0min，多糖最大提取率可达6.61％。4．对红汁乳菇多糖提取液的超滤条件进行研究，得出其最佳工艺条件为：超滤膜规格为5KD、超滤压力为0.1 MPa、温度为30℃。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 食用菌的研究概况
• 1.2.1 食用菌的营养价值
• 1.2.1.1 蛋白质
• 1.2.1.2 必需氨基酸
• 1.2.1.3 脂肪
• 1.2.1.4 维生素和矿物质
• 1.2.2 食用菌多糖的研究
• 1.3 红汁乳菇的研究概况
• 1.3.1 红汁乳菇生态研究
• 1.3.2 红汁乳菇生长培养研究
• 1.3.3 红汁乳菇生理生化研究
• 1.3.3.1 营养价值
• 1.3.3.2 药用价值
• 1.3.3.3 化感作用
• 1.4 研究的目的、意义与内容
• 1.4.1 研究目的及意义
• 1.4.2 主要实验内容
• 1.4.3 实验的创新点
• 1.4.3.1 工艺
• 1.4.3.2 实验设计方法
• 1.4.3.3 实验菌种
• 第二章 红汁乳菇菌种的分离与驯化培养
• 2.1 实验材料与培养基
• 2.1.1 实验菌种
• 2.1.2 实验培养基
• 2.1.3 实验试剂与仪器
• 2.1.3.1 试剂
• 2.1.3.2 设备
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 子实体的形态特征观察
• 2.2.2 菌种分离驯化
• 2.2.2.1 组织分离
• 2.2.2.2 孢子分离
• 2.2.3 菌丝体形态特征的观察
• 2.2.4 生长曲线的绘制
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 红汁乳菇形态特征
• 2.3.2 红汁乳菇在不同培养基上的生长情况
• 2.3.3 红汁乳菇菌丝体与子实体的微观特征
• 2.3.4 生长曲线
• 2.4 小结
• 第三章 红汁乳菇子实体和菌丝体营养成分测定
• 3.1 材料与试剂
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 药品
• 3.1.3 试剂
• 3.1.4 实验设备
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 样品预处理
• 3.2.2 水分含量测定
• 3.2.2.1 方法
• 3.2.2.2 计算公式
• 3.2.3 粗蛋白含量测定
• 3.2.3.1 方法
• 3.2.3.2 计算公式
• 3.2.4 粗脂肪测定
• 3.2.4.1 方法
• 3.2.4.2 计算公式
• 3.2.5 灰分测定
• 3.2.5.1 方法
• 3.2.5.2 计算公式
• 3.2.6 粗多糖含量测定
• 3.2.6.1 方法
• 3.2.6.2 计算公式
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 水分含量测定结果
• 3.3.2 粗蛋白含量测定结果
• 3.3.3 粗脂肪测定结果
• 3.3.4 灰分测定结果
• 3.3.5 粗多糖测定结果
• 3.3.5.1 葡萄糖标准曲线
• 3.3.5.2 F 值的确定
• 3.3.5.3 多糖糖含量测定结果
• 3.4 小结
• 第四章 红汁乳菇深层培养条件研究
• 4.1 实验材料与设备
• 4.1.1 实验试剂
• 4.1.2 实验仪器与辅助软件
• 4.1.2.1 实验设备
• 4.1.2.2 辅助软件
• 4.2 实验方法与设计
• 4.2.1 液体菌种的制备
• 4.2.2 关键因子的筛选
• 4.2.3 培养条件的优化
• 4.2.4 响应值的检测
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 液体菌种制备和选取
• 4.3.2 关键因子的选取和范围确定
• 4.3.2.1 关键因子的确定
• 4.3.2.2 因子范围确定
• 4.3.3 模型方程的建立与检验
• 4.3.3.1 中心旋转实验的结果
• 4.3.3.2 模型方程的建立
• 4.3.3.3 模型验证结果
• 4.3.4 菌丝产量的响应面分析与优化
• 4.3.5 最优化培养条件
• 4.4 小结
• 第五章 红汁乳菇多糖提取工艺研究
• 5.1 材料与设备
• 5.1.1 实验药品与试剂
• 5.1.1.1 药品
• 5.1.1.2 试剂
• 5.1.2 实验设备
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 单因子实验
• 5.2.1.1 提取时间
• 5.2.1.2 料液比
• 5.2.1.3 提取温度
• 5.2.1.4 提取次数
• 5.2.2 Box-Behnken 实验设计
• 5.2.3 多糖提取率的检测
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 单因子实验
• 5.3.1.1 提取时间
• 5.3.1.2 料液比
• 5.3.1.3 提取温度
• 5.3.1.4 提取级数
• 5.3.2 方程模型的建立与检验
• 5.3.2.1 Box─Behnken 实验设计
• 5.3.2.2 Box─Behnken 实验结果
• 5.3.2.3 模型方程的建立
• 5.3.2.4 方程的方差分析
• 5.3.2.5 模型验证结果
• 5.3.3 多糖提取率的响应面分析与优化
• 5.3.4 最佳提取工艺
• 5.4 小结
• 第六章 红汁乳菇多糖分离纯化研究
• 6.1 材料与设备
• 6.1.1 实验材料与试剂
• 6.1.2 实验仪器
• 6.2 实验方法
• 6.2.1 多糖提取方法
• 6.2.2 超滤分离
• 6.2.3 多糖含量检测
• 6.2.4 截留率计算
• 6.3 实验结果与讨论
• 6.3.1 提取结果
• 6.3.2 超滤膜选择
• 6.3.3 超滤压力的选择
• 6.3.4 超滤温度的选择
• 6.4 小结
• 第七章 结论与展望
• 7.1 结论
• 7.1.1 菌种分离与纯培养
• 7.1.2 营养测定深层培养条件的优化
• 7.1.3 超声分离提取工艺
• 7.1.4 存在的问题
• 7.2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录