姚家成:根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解代谢中agnH基因的克隆表达与纯化论文

姚家成:根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解代谢中agnH基因的克隆表达与纯化论文

本文主要研究内容

作者姚家成,夏珍珍,黄粤,皮婷,梅枫,何冬兰,程国军,刘涛,李晓华(2019)在《根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解代谢中agnH基因的克隆表达与纯化》一文中研究指出:对从湖北省襄阳市烟草种植土壤中分离筛选得到的尼古丁降解菌根癌土壤杆菌SCUEC1菌株中agnH基因进行克隆表达,并对AgnH蛋白的表达和纯化条件进行优化,为解析agnH基因的功能和揭示根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解的分子机制提供理论依据。通过PCR扩增获得agnH全长基因(585bp),构建重组质粒pET28a(+)-agnH,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,研究不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间对重组质粒pET28a(+)-agnH诱导表达的影响,用不同浓度的咪唑洗脱液洗脱重组蛋白,采用SDS-PAGE检测重组蛋白。结果表明:在IPTG浓度为0.4mmol/L、诱导温度为25℃且诱导时间为25h条件下,AgnH蛋白表达量较高;在250mmol/L的咪唑洗脱液洗脱下,得到浓度较高的AgnH蛋白。

Abstract

dui cong hu bei sheng xiang yang shi yan cao chong zhi tu rang zhong fen li shai shua de dao de ni gu ding jiang jie jun gen ai tu rang gan jun SCUEC1jun zhu zhong agnHji yin jin hang ke long biao da ,bing dui AgnHdan bai de biao da he chun hua tiao jian jin hang you hua ,wei jie xi agnHji yin de gong neng he jie shi gen ai tu rang gan jun SCUEC1jun zhu ni gu ding jiang jie de fen zi ji zhi di gong li lun yi ju 。tong guo PCRkuo zeng huo de agnHquan chang ji yin (585bp),gou jian chong zu zhi li pET28a(+)-agnH,zhuai hua da chang gan jun BL21(DE3)jun zhu jin hang yi yuan biao da ,yan jiu bu tong IPTGnong du 、you dao wen du he you dao shi jian dui chong zu zhi li pET28a(+)-agnHyou dao biao da de ying xiang ,yong bu tong nong du de mi zuo xi tuo ye xi tuo chong zu dan bai ,cai yong SDS-PAGEjian ce chong zu dan bai 。jie guo biao ming :zai IPTGnong du wei 0.4mmol/L、you dao wen du wei 25℃ju you dao shi jian wei 25htiao jian xia ,AgnHdan bai biao da liang jiao gao ;zai 250mmol/Lde mi zuo xi tuo ye xi tuo xia ,de dao nong du jiao gao de AgnHdan bai 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自华中农业大学学报的姚家成,夏珍珍,黄粤,皮婷,梅枫,何冬兰,程国军,刘涛,李晓华,发表于刊物华中农业大学学报2019年02期论文,是一篇关于根癌土壤杆菌菌株论文,尼古丁降解代谢论文,基因论文,基因克隆论文,蛋白表达与纯化论文,华中农业大学学报2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自华中农业大学学报2019年02期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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