论文摘要
刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)属于原生动物门、纤毛亚门、寡膜纤毛纲、膜口亚纲、膜口目、凹口科、隐核虫属,广泛分布于热带、亚热带海域。刺激隐核虫传染性很强,可感染尖吻鲈、紫红笛鲷、红鳍东方鲀、大黄鱼、美国红鱼、鲈鱼、金鲳、石斑鱼、真鲷、黑鲷、红鳍笛鲷等多种的海水网箱养殖鱼类。近年来,由于海水养殖鱼类集约化程度不断提高,部分养殖海区富营养化加剧,海区水交换不畅,导致由刺激隐核虫引起的“白点病”频发,给海水鱼养殖业造成了巨大的经济损失。鉴于刺激隐核虫对海水养殖业的巨大危害,其所引起的海水鱼疾病已被列为水生动物二类疫病。虽然,刺激隐核虫危害很大,国内外学者也进行了大量的研究,但目前仍未有防治良策。本文对采自福建宁德养殖大黄鱼的刺激隐核虫进行活体传代、低温保存、体外培养、趋化实验等系列研究,以期进一步深化对刺激隐核虫的认识,并对刺激隐核虫的研究及海水鱼刺激隐核虫病防治提供有价值的参考。利用卵形鲳鲹的活体传代实验结果表明:在26℃水温情况下,1周就可完成刺激隐核虫的传代培养,产量稳定,收集的包囊大小一致且圆润;在每次感染2 h后即将卵形鲳鲹移至另一圆桶内饲养,就可保证幼虫的同步性,进而保证收集的胞囊大小、发育时期都基本一致;用平皿法直接收虫,简便易行。体外培养实验结果表明:刺激隐核虫的幼虫能在含L-15与胎牛血清的液体培养基中生长,鲈鱼血清对幼虫生长的促进效果好于鲈鱼的粘液和肌肉匀浆液。2 ml培养液中鲈鱼血清的添加量为300μl时,幼虫的生长情况好于100μL、200μL和400μL的添加量。加入鲈鱼鳃丝不利于幼虫的生长。虽然各实验室刺激隐核虫的幼虫都有一定程度的生长,但是大部分都生长不良,而且全都不能发育成胞囊。虽然这些滋养体没能进一步发育成胞囊,但为今后刺激隐核虫体外培养积累了有价值的参考。应用本实验室建立的趋化模型对刺激隐核虫的趋化性进行了深入研究。结果表明:刺激隐核虫的幼虫在30 min时趋化率最高,在温度26℃-28℃之间趋化率达到最高。不同海水鱼类甚至淡水鱼的血清与粘液对刺激隐核虫的幼虫都有着强烈的吸引作用,而一些小分子物质(碳水化合物、氨基酸、糖类)对刺激隐核虫的幼虫没有趋化作用。在各种组织匀浆液中,除了肌肉匀浆液对刺激隐核虫的幼虫有一定的吸引作用外,肝、肠、胃的匀浆液并没有趋化作用。感染后鱼类血清对刺激隐核虫的幼虫有着更加强烈的吸引作用(P<0.01)。对18种中草药对刺激隐核虫的趋化性研究发现:当浓度为0.2 g/L时,18种中草药有9种中草药有驱虫效果,当浓度降低至0.05 g/L时,只有五倍子、大黄、槟榔、苦楝、虎杖、贯众6种中药草对刺激隐核虫的幼虫有驱虫效果。