皮肤感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性研究及耐药基因的检测

论文摘要

目的：（1）了解皮肤感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA）的感染及耐药情况；（2）检测表型耐药鉴定出的MRSA中mecA、PVL基因的表达情况；（3）检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因型及耐药基因。方法：收集2010年1月-8月新疆医科大学第一附属医院皮肤科门诊就诊的242例皮肤和软组织感染患者,（1）应用K-B纸片扩散法分离MRSA,并检测MRSA对9种抗菌药物的耐药性；（2）应用聚合酶链反应方法（Polymerase- Chain Reaction, PCR）对表型耐药检测出的MRSA进行necA基因检测,（3）应用PCR法进行SCCmec基因型和耐药基因的检测。结果：（1）MRSA的检出率为8.7%（21/242）,；（2）应用K-B纸片法对9种抗生素的药敏试验结果为：青霉素100%、头孢唑林47.62%、红霉素42.86%、四环素38.09%、克林霉素33.33%、庆大霉素28.57%、氯霉素23.81%,环丙沙星19.05%、万古霉素0%；（3）应用PCR方法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA阳性21株,检出率为100%,PVL阳性12株,检出率为57.1%,本次实验中SCCmec型以Ⅳ型为主,占57.1%（12/21）,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型检出率分别为4.8%（1/21）、9.5%（2/21）,28.6%（6/21）。最常见的耐药基因是erm,检出率为49.8%（9/21）,ant（4,,4”）未检出；aac（6,）/aph（2”）、aph（3,）-Ⅲ、tetM检出率分别为28.6%（6/21）、23.8%（5/21）、38.1%（8/21）。结论：（1）我院皮肤科门诊MRSA的检出率低于国内外其它地区的报道；（2）MRSA呈现多重耐药,尚未发现万古霉素耐药株；（3）我院皮肤科门诊患者皮肤感染MRSA中耐药基因的携带率较低。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 研究内容与方法
• 1. 材料
• 1.1 研究对象
• 1.2 主要实验试剂
• 1.3 主要仪器设备
• 2. 方法
• 2.1 菌株采集和储存
• 2.2 菌种鉴定
• 2.3 Slidex Staph Plus乳胶凝集法快速检测金葡菌
• 2.4 MRSA的检测
• 2.5 药物敏感性试验
• 3. PCR部分的材料及设备
• 3.1 菌株来源
• 3.2 实验仪器
• 3.3 主要试剂及制备
• 3.4 质控菌株
• 3.5 引物
• 4. PCR部分的实验方法
• 4.1 DNA模板的制备
• 4.2 PCR反应体系
• 4.3 PCR反应条件
• 4.4 琼脂糖凝胶电泳及结果判定
• 5 统计分析
• 结果
• 1 临床资料
• 2 药敏实验结果
• 3 PCR扩增mecA基因结果
• 4 PCR扩增SCCmec基因型结果
• 5 PCR扩增耐药基因结果
• 讨论
• 1 临床资料
• 2 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药总体情况
• 3 医院获得性MRSA和社区获得性MRSA流行情况
• 4 MRSA的治疗
• 5 MRSA的预防
• 6 MRSA的检测方法
• 7 mecA基因检测意义
• 8 PVL基因检测意义
• 9 SCCmec基因分型情况
• 10 MRSA耐药基因检出情况
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表