论文摘要
目的结肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，目前首选治疗方式主要采用手术切除为主化学药物和放射治疗为辅的综合治疗。在化疗过程中，肿瘤细胞对化疗药物的不敏感是导致化疗失败的主要原因，从而导致肿瘤的复发和转移。热休克蛋白（heat shock protein，HSP）作为分子伴侣对于细胞生长、发育和调节过程有着重要作用，是一组具有广泛而重要生物学功能的蛋白质。热休克蛋白90β（HSP90β）作为热休克蛋白家族的一员，是导致肿瘤细胞耐药的因素之一。本研究通过观察HSP90β在正常结肠组织和结肠癌组织中表达情况的差异及其与肿瘤病理分级、Duke’s分期之间的关系，研究HSP90β与结肠癌发生、发展之间的联系；通过对比结肠癌亲本细胞与耐药细胞中HSP90βmRNA的表达差异，初步阐明HSP90β与结肠癌细胞化疗药物耐药的相关性。方法收集中南大学湘雅医院普通外科和肝胆肠外科2005年1月至2005年12月手术切除的结肠癌组织标本72例，癌旁正常组织30例，运用免疫组织化学染色方法观察HSP90β在结肠癌组织以及癌旁正常组织的表达情况，分析HSP90β的表达水平与结肠癌组织的病理分级、Duke’s分期之间的关系。MTT法检测结肠癌亲本细胞HCT-8和耐药细胞HCT-8／VCR对长春新碱（VCR）药物敏感性，运用RT-PCR检测HCT-8和HCT-8／VCR细胞中HSP90βmRNA表达水平的变化，分析HSP90β的表达水平与HCT-8细胞对长春新碱耐药性之间的关系。结果免疫组织化学显示结肠癌和癌旁正常组织中均有HSP90β的阳性表达，癌组织中的表达阳性率为30／72（41.67％），明显高于癌旁正常结肠组织5／30（16.67％）（P＜0.05），HSP90β在结肠癌组织中的表达水平与肿瘤的病理学分级之间有正相关性（P＜0.05），与肿瘤的Duke’s分期之间无明显关系（P＞0.05），与肿瘤的淋巴结转移之间无明显关系（P＞0.05），与肿瘤的浸润深度之间无明显相关（P＞0.05），与肿瘤的远处转移之间亦无显著性相关（P＞0.05）。MTT检测长春新碱（VCR）对结肠癌亲本细胞HCT-8的半数有效浓度（IC50）为（3.79±0.66）×10-2μg/ml，而长春新碱（VCR）对其耐药细胞HCT-8／VCR的半数有效浓度（IC50）为4.41±1.72μg／ml，两者之间存在差异（P＜0.05），HSP90βmRNA在HCT-8／VCR细胞中的相对含量（0.955±0.03）明显高于在HCT-8细胞中的相对含量（0.835±0.029）（P＜0.05），表明HSP90β的表达水平与HCT-8细胞对长春新碱的耐药性有关系。结论结肠癌组织中HSP90β的表达阳性率与水平均高于癌旁正常组织，HSP90β的高表达可能参与了结肠癌的恶性转化。以长春新碱处理结肠癌HCT-8细胞可以使该细胞对长春新碱的耐药性升高，HSP90β在细胞中的表达水平与细胞对长春新碱的耐药性有关系，HSP90β的高表达可能参与了结肠癌细胞对化疗药物耐药性的产生。