半夏内生菌的分离及其内生真菌对宿主生长影响的研究

论文摘要

随着越来越多的内生菌在植物体内被发现,从药用植物体内生菌中开发利用新的活性化合物成为了目前研究的一个热点。研究内生菌与宿主药用植物之间的相互关系,对于提高中药材的产量和质量,天然药物的新生产途径的研究开发及濒危药用植物资源的保护具有非常重要的理论意义和现实意义。本研究以常用中药材半夏（ Pinellia ternate（Thunb.） Breit. ）为材料,对其新鲜块茎内的内生菌进行了分离,并对所得内生真菌的生物活性进行了初步研究。主要研究结果如下:1、本研究对五月初刚出土的半夏新鲜块茎中的内生菌进行了分离,共得到内生菌菌株61株,其中内生细菌30株,内生放线菌26株,内生真菌5株。2、以半夏内生真菌为主要研究对象,对其进行了初步的形态学鉴定,并采用生长速率法分别测定其发酵液和菌丝体丙酮提取物对五种植物病原真菌的抑菌活性,结果表明:五种内生真菌的发酵液对五种植物病原菌的抑菌活性普遍高于其菌丝体丙酮提取物,其中内生真菌PI-Z02较其它四种内生真菌表现出较高的的抑菌效果。3、用半夏内生真菌发酵液处理油菜、萝卜、白菜和生菜四种作物的种子,进行种子发芽试验,研究发酵液对种子萌发的影响。结果表明:PI-Z01的发酵液具有较强的生物活性,对萝卜、白菜、油菜种子发芽普遍具有促生效果,PI-Z02对萝卜和油菜的发芽有明显的促生作用,而PI-Z03和PI-Z05在对这四种种子的发芽率方面均未表现出明显生物活性,PI-Z04发酵液对四种种子的萌发均表现出非常明显的抑制作用,其中三种种子发芽率为零。而五种内生真菌发酵液对种子萌发后芽长的影响又分别有所不同。4、测定了半夏内生真菌菌株产IAA的情况,结果表明:五种内生真菌均可产生一定量的IAA,但有很大差异;5、研究了半夏内生真菌发酵液对半夏组培苗生长的影响。结果表明PI-Z01和PI-Z02发酵液对组培苗的鲜重、株高及植株叶绿素含量均有促进作用,可以显著促进半夏组培苗的生长。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1.1 半夏的概述
• 1.1.1 半夏资源分布
• 1.1.2 半夏的生物学特性
• 1.1.3 半夏的人工栽培现状
• 1.1.4 化学成分
• 1.1.5 半夏药理活性的研究
• 1.1.6 有关半夏其他方面的研究
• 1.2 内生菌的概述
• 1.2.1 内生菌的定义及研究历史
• 1.2.2 内生菌的生物多样性
• 1.2.3 内生菌的生物学作用
• 第二章 半夏内生菌的分离
• 2.1 材料与仪器
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 试剂及仪器
• 2.2 方法
• 2.2.1 半夏内生菌的分离及纯化
• 2.2.2 材料表面消毒检验
• 2.2.3 半夏内生菌的菌种保藏
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 材料表面消毒结果检验
• 2.3.2 半夏内生菌分离结果
• 2.4 小结与讨论
• 第三章 半夏内生真菌的初步鉴定及其抑菌活性研究
• 3.1 材料及仪器
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 仪器
• 3.2 方法
• 3.2.1 内生真菌的形态学鉴定
• 3.2.2 内生真菌的液体发酵及后处理
• 3.2.3 供试菌的制备
• 3.2.4 发酵液及菌丝提取物抑菌活性测定
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 内生真菌初步鉴定结果
• 3.3.2 内生真菌生长曲线的测定结果
• 3.3.3 内生真菌对植物病原菌的抑菌活性结果
• 3.4 讨论
• 第四章 半夏内生真菌发酵液对宿主生长发育影响的研究
• 4.1 材料与仪器
• 4.1.1 供试种子
• 4.1.2 供试内生真菌
• 4.1.3 培养基
• 4.1.4 试剂与仪器
• 4.2 实验方法与内容
• 4.2.1 半夏内生真菌发酵液产IAA 的研究
• 4.2.2 内生真菌发酵液PH 值随时间变化的研究
• 4.2.3 半夏内生真菌发酵液促种子萌发活性研究
• 4.2.4 半夏内生真菌发酵产物促宿主植物生长的研究
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 半夏内生真菌发酵液产IAA 的测定结果
• 4.3.2 内生真菌发酵液pH 值随时间变化的测定结果
• 4.3.3 半夏内生真菌发酵液促种子萌发活性研究
• 4.3.4 半夏内生真菌发酵产物促宿主植物生长的研究结果
• 4.4 小结与讨论
• 第五章 结论与讨论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介