论文摘要
【目的】观察单层培养的髁状突软骨细胞加载不同静压力后,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原以及蛋白多糖表达的变化,探讨不同静压力对髁状突软骨细胞的分化及去分化的即时效应;观察单层培养的髁状突软骨细胞加载不同静压力后,其增殖、凋亡及细胞周期的变化,探讨不同静压力对髁状突软骨细胞增殖及凋亡的即时效应。 【材料和方法】选用新生SD大鼠的髁状突软骨作为原代细胞培养的组织来源,建立髁状突软骨细胞有限细胞系;应用静压力加载装置对培养的第三代髁突软骨细胞加载静压力,强度为0Kpa、12Kpa、24Kpa、36Kpa,持续时间1h;分别于加力后立即收集样本,用流式细胞仪分析各样本中细胞的DNA含量和细胞周期,并计算细胞增殖指数及凋亡指数;用免疫组织化学染色技术检测细胞分泌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原以及蛋白多糖的表达,并用彩色病理图像分析仪分析各样本的阳性表达强度。 【结果】强度为0Kpa、12Kpa、24Kpa、36Kpa持续静压力作用1h后,体外培养的髁状突软骨细胞除24 Kpa组外,其它各组的增殖活性指数及S期细胞DNA含量比例在加力结束时都较对照组小(P<0.05),其中以36Kpa组最小;除24 Kpa组的软骨细胞凋亡指数在加力结束时高于对照组外,其它组都较对照组小(P<0.05),其中以12Kpa组最小; 强度为0Kpa、12Kpa、24Kpa、36Kpa持续静压力作用1h后,体外培养的髁状突软骨细胞分泌胶原及蛋白多糖的表达为: 1.Ⅰ型胶原表达:0～12～24Kpa,Ⅰ型胶原表达增加;24～36Kpa,Ⅰ型胶原表达下降; 2.Ⅱ型胶原表达:0～12～24～36Kpa,Ⅱ型胶原的表达增加,其中,12～24Kpa,Ⅱ型胶原表达增加幅度较大,24～36Kpa,Ⅱ型胶原表达变化不大。 3.Ⅲ型胶原表达:0～12～24～36Kpa,Ⅲ型胶原的表达增加。
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