草鱼肠道优势菌种的分离、鉴定及对纤维素降解的初步研究

论文摘要

本研究通过采取不同年龄、摄食饵料有别的草鱼肠道,采集其不同肠段的内容物和肠壁,进行优势菌种的分离、纯化,鉴定,并对其进行稻草发酵试验测定发酵产物的饲料营养指标,希望得到能有效降解纤维素,提高发酵产物营养价值的菌种。通过分离、筛选最终得到两株能有效降解发酵物中粗纤维含量,提高发酵产物中的粗脂肪、粗蛋白含量的菌株。本研究主要内容和结果如下:1.通过采取不同年龄和摄食饵料有别实验草鱼的肠道,采用稀释涂布平板法和平板划线分离法相结合,对肠道菌群进行培养、分离、纯化,共筛选得到8种优势细菌菌株。2.采用显微镜直接计数法对草鱼肠道菌群进行计数,得到草鱼肠道内容物菌群数量为2.2×108～3.4×108cell/g,空肠状态下肠壁菌群数量为0.5×106～1.0×106 cell/g。3.采用pH试纸测定与调节培养基的pH值作为区分梯度相结合,筛选确定草鱼肠道菌群培养的最适pH为6.8。4.分别对8种优势菌株进行形态学观察与生理生化反应,初步鉴定菌株A为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）;菌株B为巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）;菌株C为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）;菌株D为恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）;菌株E为大肠埃希菌（Escherichia coli）;菌株F为约化噬纤维菌（Cytophaga johnsonae）;菌株G为噬纤维菌科（Cytophagaceae）,噬纤维菌属（Cytophaga）的一种,暂命名为栖地噬纤维菌;菌株H为肠杆菌科（Enterobacteriaceae）,柠檬酸杆菌属（Citobacter）中的一种,暂命名为法摩枸橼酸杆菌。5.分别对8种优势菌株进行药敏试验,了解化学药物对试验菌株的影响,旨在为水产药物的施用影响鱼类肠道菌群的组成,从而影响到鱼类正常的生理活动提供实验依据。6.分别对8种优势菌株进行稻草发酵测定其发酵产物的酶活力,结果显示:巨大芽孢杆菌、法摩枸橼酸杆菌的FPA酶活力较其他菌株高,分别为0.502mg/mL和0.381mg/mL;蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌的CMC酶活力较其他菌株高,分别为0.135 mg/mL和0.145mg/mL;巨大芽孢杆菌、法摩枸橼酸杆菌的β-葡萄糖苷酶活力较其他菌株高,分别为0.163mg/mL和0.153mg/mL。7.分别测定8种优势菌株稻草发酵产物的吸附水分、粗脂肪、粗蛋白、粗纤维和粗灰分的含量,通过对比空白对照组分析得出巨大芽孢杆菌、法摩枸橼酸杆菌的发酵效果最好。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 研究目的与意义
• 2 鱼类肠道菌群的研究现状
• 2.1 鱼类肠道菌群的形成
• 2.2 鱼类肠道菌群的数量和组成
• 2.3 鱼类肠道菌群的分布
• 2.4 鱼类肠道菌群的作用
• 3 纤维素酶的研究现状
• 3.1 纤维素酶的来源
• 3.2 纤维素酶的分类及理化性质
• 3.3 纤维素酶的作用机理
• 3.4 纤维素酶在水产养殖上的应用
• 第二章 草鱼肠道优势菌种的分离与纯化
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 草鱼肠道菌群的数量
• 2.2 肠道pH的测定及培养pH值的确定
• 2.3 草鱼肠道优势菌种的确定
• 2.4 草鱼肠道优势菌种在培养基上生长特征的观察
• 3 讨论
• 3.1 草鱼的选择
• 3.2 肠道菌群数量的计数
• 3.3 肠道菌种培养pH的确定
• 3.4 草鱼肠道优势菌种的确定
• 4 小结
• 第三章 草鱼肠道优势菌种的鉴定与生理生化特性的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 菌株的形态学特征
• 2.2 菌种的生理生化反应
• 3 讨论
• 4 小结
• 第四章 优势菌种对纤维素降解能力的测定
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 发酵产物的纤维素降解菌酶活力的测定
• 2.2 发酵产物的吸附水分的测定
• 2.3 发酵产物的粗脂肪的测定
• 2.4 发酵产物的粗蛋白的测定
• 2.5 发酵产物的粗纤维的测定
• 2.6 发酵产物的粗灰分的测定
• 3 讨论
• 4 小结
• 结论、创新和后续工作
• 参考文献
• 英文缩写符号说明
• 致谢
• 作者简介