中药哈蟆油的质量控制研究 ——哈蟆油薄层色谱研究

论文摘要

中药指纹图谱是进行中药鉴别和质量控制的有效手段。本文“哈蟆油薄层色谱研究”是哈蟆油质量控制方法中的一部分,是对现有哈蟆油质控方法的必要补充。旨在通过薄层色谱法对哈蟆油样品进行研究,建立哈蟆油TLC指纹图谱的共有模式,达到有效控制其质量的目的。采用TLC色谱法对不同提取方法、不同提取溶剂、不同吸附剂、不同显色剂以及各种类型的展开剂进行了考察,从上百种展开剂中优选出9种建立了不同来源和产地的哈蟆油样品的薄层色谱图。本文还采用TLC法建立了薄层色谱指纹图谱,共收集到了16批待研究样品,用系统溶剂提取法和正交实验优选了供试品溶液的制备方法,用均匀设计法优选展开剂组成,采用了乙酸乙酯进行超声提取法制备供试品溶液,以正己烷:丙酮:冰醋酸(8:2:1)为展开剂,采用硅胶G薄层板,在温度为5℃,相对湿度为65%,预饱和10min的条件下进行二次展开,展距9cm,以磷钼酸试液为显色剂得到的哈蟆油TLC指纹图谱的效果比较理想,经过方法学验证,精密度,重复性,稳定性试验相对峰高的RSD值均小于5%,相似度均大于0.9,符合指纹图谱的要求,11种不同来源和产地的样品以4个共有指纹峰的相似度、Rf值、相对峰高作为鉴别的依据。经过直观分析和聚类分析验证了实验结果,不仅提供了哈蟆油的种属特征,同时还反映了不同样品的个体差异,为鉴别哈蟆油提供了一种新的方法。本实验建立了哈蟆油的TLC指纹图谱,能够有效的监测哈蟆油的质量,作为其质量控制的手段,为名贵动物药哈蟆油的开发和利用奠定了基础。

论文目录

• 中文提要
• 英文提要
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1 中药质量控制方法的研究进展
• 1.1 中药质量控制的现状
• 1.2 近代中药质量控制方法的发展
• 1.3 现代中药质量控制方法的发展
• 1.4 指纹图谱在中药质量控制中的作用和意义
• 2 哈蟆油质量控制方法的研究现状
• 2.1 基源鉴别法
• 2.2 性状鉴别法
• 2.3 显微鉴别法
• 2.4 理化鉴别法
• 2.4.1 荧光检查
• 2.4.2 化学定性分析
• 2.4.3 化学定量分析
• 2.4.4 光谱分析
• 2.4.4.1 可见分光光度法
• 2.4.4.2 紫外光谱法
• 2.4.4.3 红外光谱法
• 2.4.4.4 原子吸收和发射光谱法
• 2.4.5 色谱分析
• 2.4.5.1 薄层色谱法
• 2.4.5.2 高效液相色谱法
• 2.4.5.3 气相色谱-质谱法
• 2.5 生物鉴别法
• 2.5.1 电泳分析法
• 2.5.2 放射性免疫分析法
• 2.5.3 多聚酶链式反应（PCR）技术
• 3 中药指纹图谱研究概况
• 3.1 国外指纹图谱的研究
• 3.2 国内指纹图谱的研究
• 3.3 薄层色谱指纹图谱
• 第二章 TLC指纹图谱研究的目的、方法及影响因素
• 1 论文研究目的
• 2 论文研究意义
• 3 展开剂系统构建的点滴实验法和均匀设计法
• 4 薄层色谱展开及图像处理对中药指纹图谱的影响
• 4.1 点样
• 4.2 温度的影响
• 4.3 湿度的影响
• 4.4 预饱和的影响
• 4.5 显色方法
• 4.6 拍照及图像处理
• 4.7 斑点分离度的影响
• 第三章 薄层色谱研究方法和条件的确立
• 1 样品、试剂、仪器
• 1.1 正品哈蟆油药材
• 1.2 试剂
• 1.3 仪器
• 2 供试品溶液制备方法的研究
• 2.1 提取溶剂的选择和确定
• 2.2 提取方法的选择和确定
• 3 对照品溶液的选择和确定
• 4 吸附剂的选择和确定
• 5 展开剂的选择和确定
• 6 显色剂的选择和确定
• 7 展开方式的选择和确定
• 8 实验结果的验证
• 第四章 哈蟆油TLC指纹图谱研究
• 1 样品、试剂、仪器
• 1.1 正品哈蟆油药材
• 1.2 试剂
• 1.3 仪器
• 2 供试品溶液的制备
• 2.1 提取溶剂的选择
• 2.2 定容溶剂的选择
• 2.3 提取方法的选择
• 2.3.1 不同提取方法的考察
• 2.3.2 提取方法的优化
• 3 点样
• 4 薄层色谱条件的选择
• 4.1 薄层板的选择
• 4.2 展开条件的选择
• 4.2.1 展开剂的优选
• 4.2.1.1 点滴实验法构建四元展开剂系统
• 4.2.1.2 均匀设计实验构建展开剂
• 4.2.2 展开方式的选择和确定
• 4.2.3 不同温度条件的考察
• 4.2.4 不同湿度条件的考察
• 4.2.5 预饱和时间的考察
• 4.3 显色条件的选择
• 5.薄层扫描条件的确定
• 6.TLC色谱指纹图谱的方法学验证
• 6.1 精密度实验
• 6.2 重复性实验
• 6.3 稳定性实验
• 7 哈蟆油薄层色谱指纹图谱的建立与评价
• 7.1 哈蟆油TLC指纹图谱建立
• 7.2 哈蟆油TLC指纹图谱相似度
• 7.3 哈蟆油TLC指纹图谱的识别
• 7.4 哈蟆油TLC指纹图谱的分析与评价
• 7.4.1 直观分析
• 7.4.2 聚类分析
• 第五章 结束语
• 1 哈蟆油薄层色谱研究依据与思路的探讨
• 2 哈蟆油TLC指纹图谱的方式与结果的探讨
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 已发表文章