首页> 正文

水稻苯达松敏感致死基因的SCAR标记及其辅助育种

2020-11-22阅读(901)

水稻苯达松敏感致死基因的SCAR标记及其辅助育种

论文摘要

籼稻（Oryza sative L.）品种8077S是一种具有隐性苯达松敏感致死基因（bel）的水稻两用不育系,其自交种苗能被除草剂苯达松杀死。将这种隐性单基因转育其它水稻光温敏雄性不育系应用于两系杂交稻制作,可以通过直接喷雾一定浓度的苯达松溶液简便有效地杀死两系杂交稻秧苗中可能混入的母本自交苗,从而避免两系杂交稻因水稻光温敏雄性不育系的育性波动所造成的风险。隐性苯达松敏感致死基因在常规育种中表现低频率,而且要经过轮流进行多代的回交和自交,才能选育出含bel基因的新品种。利用分子标记辅助育种,在短世代内能显著减少连锁累赘,从而提高育种效率。因此,本研究致力寻找与bel基因紧密连锁的分子标记,并以此分子标记辅助育种。具体结果如下: 1.用五种方法提取了水稻基因组DNA,并进行了RAPD-PCR分析,结果表明这五种方法提出的DNA质量都能获得稳定而理想的PCR扩增效果。 2.通过预备试验,优化了水稻RAPD反应组份和反应程序,建立了适于水稻RAPD反应条件。采用随机引物S20、S316对8077S×丰35的F2代进行了RAPD分析,得到两个标记片段S20-420和S316-600。 3.将RAPD扩增产生的多态性片段进行克隆、测序,根据测序结果合成了两对特异性的SCAR引物,新合成的SCAR引物包含原有的RAPD引物序列。SC01引物在敏感单株中扩增出一条423bp带,抗感单株没有扩增产物;SC02引物在敏感单株中扩增出一条606bp带,抗感单株（纯合）扩增出一条约630bp带,抗感单株（杂合）扩增出这两条带。与RAPD标记相比,SCAR标记扩增出的条带清晰可辨,结果更可靠。 4.以8077S为母本分别与3个水稻品种明恢63、丰35、R318-5杂交,并以相应的水稻品种为轮回亲本进行回交,从F2代开始用获得的引物SC02选择有bel基因的单株,并继续回交。结果证明用SCAR标记进行标记辅助选择更简便、快捷,可大大缩短恢复系的育种年限,加快育种进程。 5.利用水稻单粒干种子作材料,进行了DNA提取方法研究,并利用引物SC01对杂交种子纯度进行了的初步鉴定。

论文目录

  • 一、前言
  • 1.选题意义
  • 2.常用分子标记的主要类型
  • 3.DNA分子标记在水稻遗传育种中的应用
  • 二、材料与方法
  • 1.主要仪器和设备
  • 2.主要试剂
  • 3.试验材料
  • 4.单隐性突变基因的验证
  • 5.水稻基因组DNA的提取
  • 6.模板DNA浓度和纯度的分析测定
  • 7.RAPD目的片断的扩增
  • 8.特异片段的回收
  • 9.二次PCR
  • 10.特异带的连接、转化与克隆
  • 11.质粒DNA的提取
  • 12.酶切鉴定克隆结果
  • 13.DNA序列测定
  • 14.引物设计
  • 15.引物检测及连锁分析
  • 16.标记辅助选择
  • 17.种子纯度鉴定
  • 三、结果与分析
  • 1.水稻基因组DNA的提取效果
  • 2.优化RAPD的反应体系
  • 3.与目的片断紧密连锁的多态性片断的获得
  • 4.目的片断的回收与重扩增
  • 5.连接产物的转化结果
  • 6.质粒的酶切鉴定
  • 7.特异片段的测序结果及SCAR引物对设计
  • 2分离群体的SCAR分析'>8.F2分离群体的SCAR分析
  • 9.标记辅助选择
  • 10.杂交种子纯度鉴定
  • 四、讨论
  • 1.关于水稻基因组DNA的提取
  • 2.RAPD反应条件及反应体系的建立
  • 3.关于目的片段的回收、克隆及SCAR引物设计
  • 4.RAPD标记转换为SCAR标记的必要性
  • 5.SCAR标记在辅助选择育种上的可行性
  • 6.关于种子纯度鉴定
  • 结论
  • 参考文献
  • 致谢

    • 相关论文文献

    • [1].小麦花粉育性检测和花粉致死基因携带种质的鉴定[J]. 种子 2019(07)
    • [2].介绍一组与致死基因相关例题[J]. 生物学教学 2009(05)
    • [3].一种基于仿真的预测癌细胞致死基因的方法[J]. 北京生物医学工程 2017(06)
    • [4].日本血吸虫幼虫巨大致死基因片段的克隆、表达及免疫效果分析[J]. 中国预防兽医学报 2011(07)
    • [5].杂交水稻机械化制种技术研究及组合选育进展[J]. 安徽农业科学 2011(09)
    • [6].花粉致死基因ZmAA1对玉米遗传转化的研究[J]. 华北农学报 2016(03)
    • [7].杂交水稻机械化制种技术研究及组合选育进展(英文)[J]. Agricultural Science & Technology 2011(01)
    • [8].马铃薯甲虫RNA干扰高效致死基因的筛选[J]. 新疆农业科学 2019(07)
    • [9].甘蓝杂种致死材料的鉴定与遗传分析[J]. 中国蔬菜 2015(01)
    • [10].浅析摩尔根的假设[J]. 中学生物学 2016(02)
    • [11].小麦花粉致死基因Ki的SSR标记分析[J]. 中国农学通报 2015(26)
    • [12].黑曲霉高效敲除体系构建及tpsA基因的敲除[J]. 食品研究与开发 2018(22)
    • [13].一种快速高效的基于CcdB致死基因和SmaⅠ酶切位点的克隆体系构建[J]. 基因组学与应用生物学 2017(07)
    • [14].一种高效低背景T载体的构建[J]. 中国生物工程杂志 2010(12)
    • [15].基于合成致死策略寻找ARID1A突变肝细胞癌的治疗靶点[J]. 基因组学与应用生物学 2019(07)
    • [16].各类致死问题讨论[J]. 教学考试 2017(15)
    • [17].利用毒素蛋白基因ccdB构建高效低背景T-载体[J]. 热带生物学报 2016(02)
    • [18].植物杂种致死研究进展[J]. 中国农业科技导报 2015(02)
    • [19].水稻雄性不育突变体012S-3的遗传分析和基因定位[J]. 分子植物育种 2015(06)
    • [20].例析高中生物遗传学中的致死现象[J]. 中学生物学 2015(02)
    • [21].更正声明[J]. 畜牧与兽医 2020(01)
    • [22].孟德尔比率偏离的两大类型[J]. 高中生 2008(12)
    • [23].高效大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)基因敲除体系的构建[J]. 微生物学报 2011(07)
    • [24].“遗传基本规律”高考热点冲刺[J]. 中学生数理化(高考版) 2009(02)
    • [25].甘蓝杂种致死遗传现象浅析及利用[J]. 长江蔬菜 2020(08)
    • [26].草地贪夜蛾潜在RNAi靶标致死基因及纳米载体介导RNAi技术的应用和展望[J]. 植物保护学报 2020(04)
    • [27].一种特殊的性状分离比——6:3:2:1[J]. 生物学教学 2010(07)
    • [28].Bcl-2/Bax在宫颈癌诊断中的研究进展[J]. 中国优生与遗传杂志 2010(08)
    • [29].突变型p53与其合成致死基因的研究进展[J]. 遗传 2015(04)
    • [30].关于遗传负荷的学习[J]. 品牌 2014(09)

    标签：;  ;  ;  ;  

    水稻苯达松敏感致死基因的SCAR标记及其辅助育种
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕速过 版权所有 鄂ICP备12018319号-5