论文摘要
目的 1、探索SD大鼠脂肪组织来源干细胞（adipose derived stem cells，ADSCs）的体外培养方法，观察其体外增殖能力及生物学特性，对细胞表面干细胞相关标志进行鉴定，为脂肪干细胞的进一步研究奠定基础。 2、对原代及第3代ADSCs向脂肪细胞、成骨细胞、成脂肪细胞定向诱导，观察其多向分化潜能，并探讨其体外成骨能力，为ADSCs作为骨组织工程种子细胞提供理论依据。 3、扩增、纯化本实验室所构建的含重组人骨形态发生蛋白-2（human bone morphogenetic protein，hBMP-2）基因和含绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）基因的重组腺病毒表达载体（Ad-hBMP-2，Ad-GFP），并测定其滴度；研究ADSCs经基因转染后生物学行为的变化和目的基因的表达，应用Ad-GFP转染细胞，测定腺病毒转染效率。 4、探索以Ad-BMP-2转染的ADSCs作种子细胞，并以壳聚糖—磷酸三钙（CTCP）为支架材料，构建组织工程化骨的可行性，观察在无免疫力的裸鼠体内成骨情况，和在有免疫力的SD大鼠体内修复下颌骨缺损的效果。 方法 1、从3周龄SD大鼠腹股沟脂肪垫分离出脂肪组织，通过Ⅰ型胶原酶消化法获取原代ADSCs，适时传代。逐日倒置显微镜观察细胞形态及生长特征；研究其增殖过程，MTT法绘制出生长曲线；采用免疫组化、免疫荧光流式细胞术对细
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