珍稀植物连香树组织培养技术体系研究

论文摘要

连香树（Cercidiphyllum japonicum Sieb. et Zucc.）为东亚著名孑遗植物,是国家二级珍贵树种和二级重点保护植物。连香树雌雄异株,结实少。种子细小,天然更新困难,在自然状态下已处于濒危状态。为保护这一珍贵植物资源,利用组织培养技术扩大其种群数量,是保护稀有和珍贵树种的有效手段。为探索连香树组织培养快速繁殖体系,本试验以连香树一年生带腋芽茎段、叶片、叶柄、芽、当年生带芽茎段、未成熟的种子作外植体,建立了以当年生带芽茎段和未成熟种子为外植体的组织培养体系,研究结果如下:1.当年生带芽茎段是良好的外植体材料。取材季节、取材部位、消毒时间等对启动培养的诱导率影响较大。6月份为最佳的取材季节,顶芽下第1-4芽是取材的较好部位。消毒灭菌用70%酒精10s,然后用0.1% HgCl6-8min为宜。尽管一年生带芽茎段的芽具有良好的萌发潜力,但因污染率较高,导致最终诱导率较低,仅为4.4%,故不是好的外植体材料。同样,越年生冬芽因污染率较高,诱导率仅为4.7%,也不是好的外植体材料。2.授粉后60d左右未成熟的连香树种子无休眠特性,在不加任何激素的MS培养基上能顺利萌发,萌发率达95%。在加有6-BA和NAA的培养基上,种子萌发后胚轴显著加粗,还能产生少量的愈伤组织。3.幼嫩的叶片、叶柄在适宜的培养基上能诱导产生愈伤组织。叶柄比叶片更容易诱导出愈伤组织,诱导率较高,最低的为66.7%,最高可达100%,随培养基激素水平的不同,愈伤组的颜色、质地有差别。叶柄诱导出愈伤组织所需的时间较短,但诱导的量比叶片少得多。4.培养条件以光照白天14h,温度26℃,夜晚10h,温度24℃,光强2000-3000lx为宜。5.当年生带芽茎段最佳启动诱导培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L,启动率可达98.2%;最佳继代增殖培养基为:1/2或1/3MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L,增殖系数可达5.3;生根培养基为:1/2MS或1/3MS+6-BA0.05 mg/L或0.1mg/L+IBA1.0mg/L或1.3mg/L,生根率可达90%。未成熟种子初代萌发最佳培养基MS+KT0.5mg/L,萌发率达95%;继代增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L或MS+6-BA0.5mg/L,增殖系数可达6.3;在生根培养基1/2MS+IBA1.0mg/L中,9d即可长出的短根,生根率达95%以上,根数为4-9条。6.连香树幼苗长至4-5cm时即可炼苗。移栽在到蛭石:珍珠岩为1:1的基质上,温度25-30℃,相对湿度80%,成活率可达95%。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• 1 文献综述
• 1.1 植物组织培养的研究概况
• 1.2 连香树的研究进展
• 1.2.1 概述
• 1.2.1.1 形态特征与生物学特性
• 1.2.1.2 地理分布和生境
• 1.2.1.3 应用价值
• 1.2.1.4 生存现状
• 1.2.2 研究进展
• 1.2.2.1 进化与系统学研究
• 1.2.2.2 群落及生态学研究
• 1.2.2.3 人工繁育及栽培技术研究
• 1.2.2.4 组织培养研究
• 2 引言
• 3 材料与方法
• 3.1 试验整体设计
• 3.2 试验材料
• 3.3 试验方法
• 3.3.1 外植体的选择
• 3.3.1.1 一年生枝条带腋芽茎段
• 3.3.1.2 幼嫩叶片、叶柄
• 3.3.1.3 芽
• 3.3.1.4 当年生带芽茎段
• 3.3.1.5 未成熟种子
• 3.3.2 组织培养体系的建立
• 3.3.2.1 当年生带芽茎段初代启动培养
• 3.3.2.2 继代增殖培养
• 3.3.2.3 生根培养
• 3.3.2.4 未成熟种子初代培养
• 3.3.2.5 继代增殖培养
• 3.3.2.6 生根培养
• 3.3.3 炼苗移栽
• 3.3.4 试验结果的观测
• 3.3.5 数据分析
• 4. 结果与分析
• 4.1 外植体的筛选
• 4.1.1 一年生枝条带腋芽茎段
• 4.1.2 幼嫩叶片、叶柄
• 4.1.3 芽
• 4.1.4 当年生带芽茎段
• 4.1.4.1 取材时间、取材部位
• 4.1.4.2 组织培养条件的筛选
• 4.1.5 未成熟种子
• 4.2 组织培养体系的建立
• 4.2.1 当年生带芽茎段
• 4.2.1.1 初代启动培养基的筛选
• 4.2.1.2 继代增殖培养
• 4.2.1.3 生根
• 4.2.2 幼种培养
• 4.2.2.1 初代培养
• 4.2.2.2 继代增殖
• 4.2.2.3 生根培养
• 4.3 炼苗移栽
• 5 结论与讨论
• 5.1 结论
• 5.2 讨论
• 5.2.1 外植体的选择
• 5.2.2 种子培养
• 5.2.3 褐化问题的解决途径
• 5.2.4 愈伤组织发生的形态
• 5.2.5 无菌苗的变异
• 5.2.6 生根培养
• 5.2.7 与前人所作工作的比较
• 5.3 进一步研究工作的设想
• 参考文献
• 英文摘要
• 图版说明