论文题目: 小鼠H-2基因位点遗传检测技术的研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 免疫学
作者: 马丽颖
导师: 岳秉飞
关键词: 近交系小鼠,遗传检测,杂交
文献来源: 中国药品生物制品检定所
发表年度: 2005
论文摘要: H-2基因复合体是决定小鼠免疫遗传品质最主要的基因群，其中以K、D基因区段产物的免疫反应性最强，最具决定性。因此建立小鼠H-2检测技术，可保障和控制实验小鼠的免疫遗传质量，完善我国实验动物遗传检测技术。 本研究分三个部分。首先建立了微量细胞毒法，引进小鼠主要组织相容性复合体国际标准单克隆抗体系列—H-2D~b(27-11-13)、H-2D~d(34-5-8)、H-2D~k(15-5-5.3)、H-2K~k(16-3.22.4)，和国产单克隆抗体H-2D~b(2)、H-2D~d(4)、H-2D~k(32)、H-2K~b(33)、H-2K~d(31)、H-2K~k(23)。制取小鼠脾细胞，加入特异的单克隆抗体，结果显示抗原与特异抗体发生强烈的免疫反应，导致同型的脾细胞死亡，通过倒置显微镜观察死亡细胞占总细胞的百分比来判定不同品系小鼠H-2基因型。同时进行了国内外单克隆抗体的对比研究，结果表明两种抗体没有显著性差别。 实验的第二部分，根据H-2D区和H-2K区的DNA序列，利用Megalin程序进行多序列比较，在各品系小鼠之间相同的区域内设计引物，扩增各品系小鼠之间不同的序列。H-2D区扩增片段为828bp，H-2K区扩增片段为104bp。经过纯化、连接、转化、测序验证扩增结果的准确性后，通过PCR方法扩增出特异区，从聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱中可观察到不同品系的小鼠H-2基因型表现出不同的电泳条带，从而可以区分不同的品系。 实验的第三部分，为了提高实验的灵敏度和特异度，建立了微孔
论文目录:
一 缩略语索引
二 中文摘要
三 Abstract
四 前言
五 第一部分 微量细胞毒检测技术研究
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 分析与讨论
5 国产抗体与进口抗体的对比研究
6 小结
六 第二部分 PCR检测方法的建立
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 分析与讨论
5 小结
七 第三部分 Southern杂交检测方法的建立
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 分析与讨论
5 小结
八 实验总结
九 参考文献
十 综述
十一 致谢
十二 在读期间发表的文章
发布时间: 2007-03-20
参考文献
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