亚麻木脂素聚合物的提取与酶法分解

论文摘要

由于亚麻木脂素突出的植物雌激素活性而受到了世界范围内学者的广泛关注。目前从脱脂亚麻籽饼中提取亚麻木脂素（SDG，下称SDG）是唯一可行的生产方法。因此有必要研究SDG的提取工艺，为工业化生产SDG打下基础。本文通过分光光度法优化了甲醇、乙醇和丙酮三种溶剂提取亚麻木脂素聚合物的条件。用高效液相色谱检测法比较了三种溶剂提取SDG的含量和收率，结果表明丙酮优于甲醇和乙醇。进一步优化丙酮的提取条件为：丙酮浓度：50%，液固比：8：1，提取温度：50℃，提取时间：3h，提取次数：2次。研究出了20%SDG聚合物的提取工艺：脱脂亚麻籽饼，7倍体积水浸3h，再用8倍、10倍、10倍体积水分别浸提三次，每次1h，最后用5倍体积的50%丙酮50℃提取2h，离心，浓缩，烘干。SDG的含量为21.57%，收率6.7mg/g；合并水提物，加入2倍体积95%酒精，收集沉淀，浓缩，干燥，其中蛋白质的含量为61%。上清液中SDG的收率为5.5mg/g。筛选出能水解SDG聚合物的脂肪酶。考察了粗酶液酶解SDG聚合物的水解条件：水解温度：45℃，水解时间：12h，水解pH为4.0，底物浓度为15mg/mL。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 亚麻概况
• 1.1.1 亚麻籽及其化学成分
• 1.1.2 亚麻籽中生物活性物质
• 1.1.2.1 亚麻蛋白
• 1.1.2.2 不饱和脂肪酸
• 1.1.2.3 植物胶和亚麻多糖
• 1.1.2.4 亚麻色素
• 1.1.2.5 木脂素类植物雌激素
• 1.1.2.6 毒副作用因子
• 1.2 亚麻木脂素
• 1.2.1 亚麻木脂素聚合物及单体的化学性质
• 1.2.1.1 亚麻木脂素聚合物
• 1.2.1.2 亚麻木脂素的化学性质
• 1.2.2 亚麻木脂素的分析
• 1.2.3 亚麻木脂素提取和分离
• 1.2.4 亚麻木脂素在人体内的代谢途径
• 1.2.5 亚麻木脂素的生物活性
• 1.2.5.1 亚麻木脂素的雌激素活性特点
• 1.2.5.2 抗癌活性
• 1.2.5.3 抗氧化活性
• 1.2.5.4 预防糖尿病
• 1.2.5.5 抗心血管系统疾病
• 1.2.5.6 亚麻木脂素其他的生理活性
• 1.2.6 亚麻木脂素的应用及专利保护情况
• 1.2.6.1 在临床医学中的应用
• 1.2.6.2 在化妆品方面的应用
• 1.2.6.3 在食品中的应用
• 1.3 本论文的研究内容
• 第二章 亚麻木脂素分析方法的建立及对亚麻籽饼成分的分析
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 实验材料
• 2.2.1.1 实验原料
• 2.2.1.2 实验试剂
• 2.2.1.3 实验仪器
• 2.2.2 实验方法
• 2.2.2.1 亚麻木脂素聚合物吸收光谱的测定及紫外吸光法的建立
• 2.2.2.2 薄层层析法分析亚麻木脂素
• 2.2.2.3 高效液相色谱法分析亚麻木脂素
• 2.2.2.4 脱脂亚麻籽粉蛋白含量的测定
• 2.2.2.5 脱脂亚麻籽粉中油脂含量的测定
• 2.2.2.6 脱脂亚麻籽粉中水分含量的测定
• 2.2.2.7 脱脂亚麻籽粉中木脂素含量的测定
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 亚麻木脂素聚合物吸收光谱的测定及紫外吸光法的建立
• 2.3.2 薄层层析法分析亚麻木脂素
• 2.3.3 高效液相色谱法分析亚麻木脂素
• 2.3.4 脱脂亚麻籽饼中主要化学成份含量的测定
• 2.3.4.1 脱脂亚麻籽粉中蛋白含量的测定
• 2.3.4.2 脱脂亚麻籽粉中油脂含量的测定
• 2.3.4.3 脱脂亚麻籽粉中水分含量的测定
• 2.3.4.4 脱脂亚麻籽粉中亚麻木脂素含量的测定
• 2.4 小结
• 第三章 亚麻木脂素聚合物提取条件的优化
• 3.1 引言
• 3.2 实验材料与方法
• 3.2.1 实验材料
• 3.2.2 实验仪器
• 3.2.3 实验方法
• 3.2.3.1 溶剂浸提中亚麻木脂素聚合物的测定
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 甲醇浸提法提取SDG聚合物
• 3.3.1.1 甲醇提取浓度的确定
• 3.3.1.2 甲醇提取液固比的确定
• 3.3.1.3 甲醇提取时间的确定
• 3.3.1.4 甲醇提取温度的确定
• 3.3.2 乙醇浸提法提取SDG聚合物
• 3.3.2.1 乙醇提取浓度的确定
• 3.3.2.2 乙醇提取液固比的确定
• 3.3.2.3 乙醇提取时间的确定
• 3.3.2.4 乙醇提取温度的确定
• 3.3.3 丙酮浸提法提取SDG聚合物
• 3.3.3.1 丙酮提取浓度的确定
• 3.3.3.2 丙酮提取液固比的确定
• 3.3.3.3 丙酮提取时间的确定
• 3.3.3.4 丙酮提取温度的确定
• 3.3.4 三种溶剂提取效果的比较
• 3.3.5 50%丙酮提取条件的优化
• 3.3.5.1 提取时间的优化
• 3.3.5.2 提取次数和溶剂量的优化
• 3.4 小结
• 第四章 亚麻木脂素聚合物的初步纯化
• 4.1 引言
• 4.2 实验材料与方法
• 4.2.1 实验材料
• 4.2.1.1 实验原料
• 4.2.1.2 实验试剂
• 4.2.1.3 实验仪器
• 4.2.2 实验方法
• 4.2.2.1 亚麻木脂素聚合物的分析方法
• 4.2.2.2 脱脂亚麻籽粉的水提取工艺
• 4.2.2.3 蛋白含量的测定
• 4.2.2.4 DNS法测定多糖的含量
• 4.2.2.5 水分的测定
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 20%的亚麻木脂素聚合物提取工艺确定
• 4.3.2 20%的亚麻木脂素聚合物提取工艺的验证实验
• 4.3.3 水提液中SDG的回收
• 4.3.4 水提物中蛋白和多糖含量的分析
• 4.4 小结
• 第五章 亚麻木脂素聚合物的酶法水解
• 5.1 引言
• 5.2 实验材料与方法
• 5.2.1 实验材料
• 5.2.1.1 实验原料
• 5.2.1.2 实验试剂
• 5.2.1.3 实验仪器
• 5.2.2 实验方法
• 5.2.2.1 亚麻木脂素聚合物酶解产物的分析方法
• 5.2.2.2 酶液的制备和粗酶液的提取
• 5.2.2.3 菌产酶诱导物量的选择
• 5.2.2.4 粗酶液酶解反应最短检测时间的确定
• 5.2.2.5 粗酶液酶解反应底物浓度的确定
• 5.2.2.6 粗酶液酶解反应温度的确定
• 5.2.2.7 粗酶液酶解反应时间的确定
• 5.2.2.8 粗酶液酶解反应pH的确定
• 5.2.2.9 酶液回收利用的考查
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 水解亚麻木脂素聚合物脂肪酶的筛选
• 5.3.2 产酶诱导物量的选择
• 5.3.3 底物中酒精助溶浓度的确定
• 5.3.4 粗酶液酶解反应最短检测时间的确定
• 5.3.5 粗酶液酶解反应底物浓度的确定
• 5.3.6 粗酶液酶解反应温度的确定
• 5.3.7 粗酶液酶解反应时间的确定
• 5.3.8 粗酶液酶解反应pH的确定
• 5.3.9 酶液回收利用的考察
• 5.4 小结
• 第六章 结论
• 参考文献
• 致谢