论文摘要
细胞表面LeX、LeY寡糖抗原是细胞膜上的两种重要的岩藻糖化糖链结构,它们参与了很多细胞生物学行为,如细胞与细胞、细胞与基质的之间识别和黏附,细胞的增殖、分化、凋亡以及肿瘤转化等。然而,在成体干细胞体外向神经分化过程中,这些岩藻糖化糖链结构是否发挥作用以及如何发挥作用,到目前为止,国内外还较少报导。在本实验中,我们研究了在人骨髓间充质干细胞(hBMMSCs)体外诱导神经分化过程中,细胞表面LeX、LeY寡糖以及合成关键酶-岩藻糖基转移酶I/IV(FUT1/4)的变化情况。通过细胞形态学观察、RT-PCR以及免疫细胞化学分析证实,在体外条件下,我们利用一种新的三步诱导法在短时间内成功地将hBMMSCs细胞定向诱导分化为神经元样细胞。经流式细胞术和免疫荧光技术,检测发现hBMMSCs细胞在诱导神经分化后,细胞表面LeX、LeY寡糖合成明显增加。并利用RT-PCR、流式细胞术和免疫荧光技术检测了LeX、LeY寡糖合成关键酶FUT1、FUT4的变化,结果显示,诱导后FUT4的表达量较诱导前有明显增加,而FUT1表达在诱导前后未见明显变化。综合以上实验结果,提示在人骨髓间充质干细胞定向诱导分化为神经元样细胞过程中,细胞表面LeX、LeY寡糖可能参与并发挥重要的作用,它们在表达水平上的变化主要是由FUT4催化决定。本实验为从糖生物学角度探索干细胞神经分化的分子机制提供了一个新的思路,并为进一步利用糖生物学原理控制干细胞神经分化成熟程度,为干细胞在神经疾病治疗中的实际应用做出基础性的贡献,具有一定的理论和实际应用价值。
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标签:人骨髓间充质干细胞论文; 神经分化论文; 岩藻糖基转移酶论文;