利塞膦酸钠对人成骨样细胞MG63护骨素及肿瘤坏死因子α表达的影响

论文摘要

目的 研究利塞膦酸钠干预对人成骨样细胞MG63护骨素（OPG）和肿瘤坏死因子α（TNFα）表达及对碱性磷酸酶活性的影响,探讨利塞膦酸钠对成骨细胞功能的影响。 方法 将人成骨样细胞MG63接种于置玻片的六孔培养板中,于第6、12、18d取出细胞片,分别采用Van Gieson氏苦味酸复红染色法、改良钙-钴法、茜素红染色法观察MG63细胞Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶在增殖、分化时期表达的变化及矿化结节的形成;将人成骨样细胞MG63予以不同浓度(10-10mol/l;10-9mol/l;10-8mol/l10-7mol/l)的利塞膦酸钠干预72h,ELISA法测定细胞条件培养液中OPG及TNFα含量的变化,比色法测定条件培养液中碱性磷酸酶的活性。 结果 对人成骨样细胞MG-63Van Gieson染色显示,MG-63细胞接种培养后第6天,细胞层胶原染色呈淡红色,未见明显骨结节形成,12天后,细胞层染色转红,可见结节形成,18天后,细胞变得极为致密,胶原染色深红;细胞培养第5天,ALP染色呈阴性,6天后,部分细胞ALP染色转为阳性,12天后,ALP阳性细胞比例明显增多,至18天几乎所有细胞ALP染色均成阳性,可见融合成块状的黑色颗粒掩盖胞核,细胞轮廓显示不清;MG-63细胞培养后18天,可见橘红色的矿化结节形成。利塞膦酸钠呈剂量依赖性下调MG63细胞TNFα的表达,上调护骨素（OPG）的表达,经利塞膦酸钠干预后,MG63细胞条件培养液中碱性磷酸酶的活性明显增高。 结论 利塞膦酸钠可通过增加成骨样细胞MG63 OPG的表达,下调TNFα的表达,从而可以间接抑制破骨细胞的活化,发挥其抗骨吸收的作用;利塞膦酸钠可促进人成骨样细胞MG63碱性磷酸酶的活性,可能对骨形成具有促进作用。

论文目录

• 1 前言
• 2 材料和方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验仪器
• 2.3 实验试剂
• 2.4 实验方法
• 2.5 统计学处理
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 致谢
• 学位论文独创性声明
• 学位论文知识产权权属说明
• 文献综述