文冠果壳苷对侧脑室注射链脲佐菌素致痴呆大鼠脑内tau蛋白磷酸化的调节作用及机制研究

论文摘要

目的文冠果壳苷是从文冠果果壳中提取的三萜皂苷类化合物。前期研究发现,文冠果壳苷可以改善多种阿尔茨海默病（AD）模型动物学习记忆障碍。但是文冠果壳苷对AD的主要病理学改变tau蛋白过度磷酸化的作用还未曾研究。大量研究发现,胰岛素信号转导通路在AD的发病过程中发挥重要作用,因此,我们选择侧脑室注射链脲佐菌素（STZ）大鼠模型用于评价文冠果壳苷对tau蛋白过度磷酸化的调节作用及进一步的机制研究。材料和方法隔日二次双侧脑室注射STZ制作大鼠痴呆模型,在第二次注射STZ后开始给药,每天大鼠灌胃给予文冠果壳苷（0.06、0.12、0.24mg/kg）、美金刚（2mg/kg）.多奈派齐（1mg/kg）或溶剂生理盐水。给药第21天进行Y迷宫实验,22-25天进行新物体辨别实验,26-30天进行Morris水迷宫实验。采用免疫印迹或免疫荧光法检测IR、IGF-1R、IGF-1、PI3K/Akt、Raf-1/ERK/CREB、hyperphosphorylated tau、GSK-3β、Cdk2、PP-1、PP-2A和O-G1cNAc的蛋白表达。结果研究发现,文冠果壳苷可以显著改善STZ致大鼠学习记忆障碍,提高IR,IGF-1R和IGF-1的表达,激活PI3K/Akt和Ras/ERK/CREB通路,文冠果壳苷显著降低了STZ诱导的tau蛋白过度磷酸化,抑制蛋白激酶GSK-3β（tyr216）磷酸化,提高蛋白磷酸酶PP-2A和PP-1的表达。文冠果壳苷还提高了大鼠海马蛋白O-G1cNAc糖基化修饰水平。结论文冠果壳苷能够改善侧脑室注射STZ致痴呆大鼠学习记忆障碍,抑制tau蛋白过度磷酸化。其机制可能是文冠果壳苷通过保护胰岛素信号转导通路,抑制PI3K/Akt依赖的GSK-3β活化,提高磷酸酶的表达,从而降低tau蛋白磷酸化水平。此外,提高蛋白O-G1cNAc糖基化水平也可能与文冠果壳苷抑制tau蛋白过度磷酸化有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 1. 关于AD发病机制的学说
• 2. AD动物模型
• 3. 学习记忆的几个调控因素
• 4. 立题依据
• 参考文献
• 第一部分 文冠果壳苷对STZ致痴呆大鼠认知功能及海马胰岛素信号通路的影响
• 一. 实验材料与方法
• 1. 材料
• 2. 方法
• 二. 实验结果
• 1. Y迷宫实验结果
• 2. 新物体辨别实验
• 3. Morris水迷宫实验结果
• 4. 文冠果壳苷对STZ致痴呆模型大鼠海马IR、IGF-1R和IGF-1表达的影响
• 5. 文冠果壳苷对STZ致痴呆模型大鼠海马PI3K/Akt通路的影响
• 6. 文冠果壳苷对STZ致痴呆模型大鼠海马Ras-MAPK通路及CREB的影响
• 三.讨论
• 1. 脑内胰岛素与学习记忆的关系
• 2. 文冠果壳苷保护痴呆模型大鼠海马胰岛素相关信号转导通路
• 四. 小结
• 参考文献
• 第二部分 文冠果壳苷对STZ致痴呆大鼠海马tau蛋白过度磷酸化的调节作用
• 一. 实验材料与方法
• 1. 材料
• 2. 方法
• 二. 实验结果
• 1. 文冠果壳苷对STZ致痴呆模型大鼠海马tau蛋白磷酸化的影响
• 2. 文冠果壳苷对STZ致痴呆模型大鼠海马蛋白激酶的影响
• 3. 文冠果壳苷对STZ致痴呆模型大鼠海马磷酸酶的影响
• 4. 文冠果壳苷对STZ致痴呆模型大鼠海马O-GlcNAc糖基化修饰的影响
• 三. 讨论
• 1. 文冠果壳苷抑制痴呆模型大鼠海马tau蛋白磷酸化
• 2. 文冠果壳苷对痴呆模型大鼠海马蛋白激酶和磷酸酶的影响
• 3. 文冠果壳苷提高痴呆模型大鼠海马蛋白O-GlcNAc糖基化修饰水平
• 四. 小结
• 参考文献
• 全文结论
• 缩略语说明
• 致谢
• 附录
• 附件1
• 附件2