儿童环孢素群体药动学研究以及发育对大鼠CYP3A和核受体表达的影响

论文摘要

目的建立CsA治疗再生障碍性贫血（再障）儿童的群体药动学模型,考察其群体药物动力学特征,为临床调整个体用药提供方法。方法利用前瞻性调查分析方法,收集浙江大学医学院附属儿童医院222例门诊再障患儿1611个全血稳态谷浓度样本,用NONMEM程序建立群体药物动力学模型,定量考察年龄、身高、体重、BSA、GFR、合并用药强的松、司坦唑醇等固定效应对药物动力学参数的影响。结果CsA稳态谷浓度药物动力学参数能用米-曼氏模型进行较好的拟合,用建模组获得的群体参数在验证组中有较理想的拟合优度。模型中最终保留了年龄、体表面积（BSA）、肾小球滤过率（GFR）、和司坦唑醇合并用药4个固定效应,米-曼氏模型参数Vm和Km为206（mg/d）、39.9（μg/L）,Vm和Km的个体间变异分别是28.0%和67.7%,个体自身的变异为29.2%。用全数据集模拟的最终模型为:DR=[206+9.64×（AGE-8.26）+225×（BSA-1.06）]×Exp（η1）×Css/（{[39.9+3.61×（GFR-1565）]×（1+0.868×STZ）}×Exp（η2）+Css）+ε结论环孢素治疗儿童再障具有明显的年龄依赖性的药动学变化特征。用本研究所得到的群体药物动力学模型结合Bayesian反馈法可以为临床儿童血液病患儿CsA的个体化用药提供方法。目的:初步研究不同出生体重新生大鼠CYP3A1/2、PXR、CAR和HNF4α表达差异及其影响CYP3A1/2的调控因素。方法:怀孕第2天的SD孕鼠,随机分配入自由进食组（nourished rats;NR）和营养限制组（undernourished rats,UR）,NR组母鼠所生仔鼠,且体重在5.2～7.2g之间的为正常出生体重组（normal birth weight group,NBW,n=15）;UR组母鼠所生仔鼠且体重＜5.2g为低出生体重组（low birth weight group,LBW,n=15）。NR组母鼠所生仔鼠且体重＞7.2g的新生大鼠为HBW（High birth weight group,HBW,n=15）组。Real-time RT-PCR方法测定CYP3A1/2、PXR、CAR和HNF4α肝组织mRNA表达。免疫组织化学方法检测CYP3A1/2,CAR和HNF4α蛋白表达和组织定位,对染色强度和阳性细胞数计分后评价蛋白表达差异。结果低出生体重显著影响了CYP3A2和CAR的mRNA表达以及CYP3A1和CAR的蛋白表达。而高出生体重显著影响了CYP3A2和HNF4α的mRNA水平,以及CYP3A1和HNF4α的蛋白表达水平。CYP3A1的mRNA与CYP3A2和HNF4α的mRNA的表达具有相关性。结论出生体重对CYP3A1/2以及核受体的表达具有不同程度的影响。提示,需注意不同出生体重新生儿对药物的反应性差异。目的研究不同发育阶段、高脂饮食状态下CYP3A1/2以及核受体的表达变化规律。探讨影响发育过程中CYP3A1/2表达调控的重要因素。方法LBW模型建立、mRNA和蛋白测定方法同本章第一节。模型分组:NBW-常规饲料组（normal birth weight-normal diet group,NN组）NBW-高脂饲料组（normal birth weight-high lipid and high energy group,NH组）LBW-常规饲料组（low birth weight-normal diet group,LN组）LBW-高脂饲料组（loW birth weight-high lipid and high energy group,LH组）以上各组大鼠分别在生后3、7、14、21、28、56和84天收集肝脏（n=6-8/组）。结果CYP3A1/2以及核蛋白PXR、CAR、HNF4α的表达具有年龄依赖性。低出生体重可以改变代谢酶和核受体表达并且一直持续到成年期,其中对PXR/CAR的改变尤为明显,而且在很大程度上与CYP3A1/2表达相关。高脂饮食可以改变代谢酶和核受体的表达,其中HNF4α基因表达的改变最为显著。结论发育过程中CYP3A以及相关核受体表达的改变和相互作用,会导致机体对物质代谢的变化,影响治疗药物的安全性和药物相互作用,临床上需关注低出生体重和肥胖患儿的合理用药。

论文目录

• 致谢
• 序言
• 摘要
• abstract
• 摘要
• abstract
• 摘要
• abstract
• 插图和附表清单
• 缩写、符号清单、术语表
• 目次
• 1 再障儿童患者环孢素群体药物动力学研究
• 1.1 前言
• 1.2 材料和方法
• 1.3 分析过程及结果
• 1.3.1 研究对象
• 1.3.2 基础模型的选择
• 1.3.3 固定效应的选择
• 1.3.4 建立最终模型的过程
• 1.3.5 最终模型参数估计
• 1.3.6 最终模型拟合效果的评价
• 1.3.7 模型验证
• 1.3.8 全数据计算群体药物动力学参数
• 1.3.9 各因素的影响情况模拟
• 1.4 讨论
• 1.5 结论
• 2 发育过程中大鼠CYP3A1/2及其核受体的表达变化研究
• 2.1 前言
• 2.2 出生体重对新生大鼠CYP3A1/2、PXR、CAR和HNF4α表达的影响
• 2.2.1 前言
• 2.2.2 材料和方法
• 2.2.3 结果
• 2.2.4 讨论
• 2.2.5 结论
• 2.3 高脂饮食对发育过程中官内生长迟缓雌性大鼠CYP3A1/2及其核受体表达的影响
• 2.3.1 前言
• 2.3.2 材料和方法
• 2.3.3 结果
• 2.3.4 讨论
• 2.3.5 结论
• 3 创新点
• 4 参考文献
• 5 作者简历及在学期间所取得的科研成果