芪仙安肠方对大鼠溃疡性结肠炎免疫机制的实验研究

芪仙安肠方对大鼠溃疡性结肠炎免疫机制的实验研究

论文摘要

目的:我们认为溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)是以脾虚为本,湿热邪毒为标,瘀血阻络贯穿始终为病机关键。芪仙安肠方是导师在临床上治疗UC的经验方,在治疗上以“益气健脾,清热利湿,化瘀解毒,生肌敛疮”为治疗大法取得较好效果。故本研究通过动物实验,进一步观察芪仙安肠方治疗UC大鼠的疗效以及探讨本方对实验大鼠免疫机制的影响。方法:本研究采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇联合造模法诱导大鼠溃疡性结肠炎动物模型(MK),于造模后第3天分别给予芪仙安肠方大(DK)、中(ZK)、小剂量(XK)和柳氮磺胺吡啶(LK)进行灌胃治疗,观察其疗效以及探讨其作用机制。实验分三个方面研究探讨:实验一观察芪仙安肠方对溃疡性结肠炎大鼠一般状态、结肠组织病理形态学及红细胞免疫的影响;实验二芪仙安肠方对溃疡性结肠炎大鼠T细胞亚群及免疫球蛋白的影响;实验三芪仙安肠方对溃疡性结肠炎大鼠ICAM-1表达的影响。通过动物实验进一步探讨本方治疗溃疡性结肠炎的可能作用机制。结果:1实验一:1.1一般状况(DAI)与MK(2.016±0.401)比较,DK(0.429±0.153)、ZK(0.496±0.144)、XK(1.304±0.212)、LK(1.286±0.299)、BK(0.378±0.133)都能明显的降低大鼠的疾病活动指数(P<0.01);其中中药组与LK之间比较,DK、ZK明显低于LK(PDK-LK<0.01) (PZK-LK<0.01);三种不同剂量中药之间比较,DK、ZK明显低于XK(PDK-XK<0.01)(PZK-XK<0.01)。1.2结肠病理组织观察MK大鼠肠黏膜层完整,可见充血水肿和炎细胞浸润;LK和三个中药组黏膜层完整,未见充血、水肿及炎细胞浸润。1.3红细胞免疫红细胞C3b受体酵母菌花环(RBC-C3bR):与MK(4.50±1.75)比较,DK(8.5±1.58)、ZK(8.31±1.75)、BK(9.31±2.09)能非常显著增高血中红细胞C3bR受体酵母菌花环(P<0.01) ;其中中药与LK(6.49±2.41)比较, DK优于LK(PDK-LK<0.05);三种不同剂量的中药之间比较,DK与XK(6.46±2.18)比较能显著提高血中红细胞C3b受体酵母菌花环(PDK-XK<0.05)。红细胞免疫复合物花环试验(RBC-ICR):与MK(2.625±0.916)比较,DK(0.875±0.732)、ZK(0.938±0.729)、BK(0.813±0.651)能明显降低红细胞免疫复合物花环(P<0.01);其中中药与LK(1.846±0.620)之间比较,DK、ZK明显低于LK(PDK-LK<0.05) (PZK-LK<0.05);三种不同剂量的中药之间的比较,DK、ZK与XK(1.825±0.667)比较能明显降低红细胞免疫复合物花环(PDK-XK<0.05) (PZK-XK<0.05)。2实验二:2.1 T细胞亚群(%)CD3:与MK(65.98±2.54)比较,DK(52.48±4.35)、ZK(53.52±3.73)、BK(48.98±3.48)均能明显降低血中CD3含量(P<0.01);其中中药与LK(61.09±1.42)之间比较,DK、ZK血中CD3的含量能明显低于LK(PDK-LK<0.01) (PZK-LK<0.01);三种不同剂量的中药之间比较,DK、ZK明显低于XK(61.33±8.53) (PDK-XK<0.01) (PZK-XK<0.01)。CD4:与MK(51.03±3.37)比较,DK(25.24±4.40)、ZK(26.49±3.07)、XK(39.97±4.48)、LK(40.36±4.63)、BK(25.18±4.42)均能明显降低血中CD4的含量(P<0.01);其中中药组与LK之间比较,DK、ZK与LK比较能明显降低血中CD4的含量(PDK-LK<0.01) (PZK-LK<0.01);三种不同剂量的中药之间的比较,DK、ZK明显低于XK(PDK-XK<0.01) (PZK-XK<0.01)。CD8:与MK(14.69±3.45)比较,DK(27.80±7.29)、ZK(27.78±6.96)、BK(27.65±6.80)能明显升高血中CD8含量(P<0.01);其中中药与LK(21.22±6.27)之间比较,DK、ZK与LK比较具有显著性差异(PDK-LK<0.01) (PZK-LK<0.01);三种不同剂量的中药之间比较,DK、ZK与XK(21.28±6.34)比较具有显著性差异(PDK-XK<0.05) (PZK-XK<0.05)。CD4/CD8 :与MK(3.469±0.224)比较, DK(1.008±0.254)、ZK(1.034±0.245)、XK(1.869±0.043)、LK(1.868±0.129)、BK(0.991±0.191)均能明显降低血中CD4/CD8的含量(P<0.01);其中中药与LK比较,DK、ZK明显低于LK(PDK-LK<0.01) (PZK-LK<0.01);三种不同剂量的中药之间比较,DK、ZK明显低于XK(PDK-XK<0.01) (PZK-XK<0.01)。2.2免疫球蛋白IgA:与MK(0.088±0.024)比较,DK(0.036±0.017)、ZK(0.041±0.019)、BK(0.035±0.022)均能明显降低血中IgA的含量(P<0.01);其中中药与LK比较,DK、ZK明显低于LK(0.063±0.026) (PDK-LK<0.05) (PZK-LK<0.05);三种不同剂量的中药之间比较,DK、ZK与XK(0.064±0.025)比较能明降低血中IgA的含量(PDK-XK<0.05) (PZK-XK<0.05)。IgG:与MK(0.169±0.082)比较,DK(0.204±0.068)、ZK(0.210±0.085)、BK(0.169±0.082)均能降低血中IgG的含量(P<0.01);其中中药组与LK(0.300±0.105)比较,DK、ZK明显低于LK(PDK-LK<0.05) (PZK-LK<0.05);三种不同剂量的中药之间比较,DK、ZK与XK(0.300±0.100)比较能明显降低血中IgG的含量(PDK-XK<0.05) (PZK-XK<0.05)。IgM:与MK(0.309±0.070)比较,BK(0.195±0.066)能明显降低血中的IgM(P<0.01);其余各组之间比较,DK(0.271±0.056)、ZK(0.272±0.050)、XK(0.297±0.041)、LK(0.300±0.050)之间无显著性差异(P>0.05)。2.3补体C3、C4C3:与MK(0.130±0.037)比较,DK(0.209±0.038)、ZK(0.206±0.018)、BK(0.216±0.036)均能明显升高血中的补体C3的含量(P<0.01);其中中药组与LK(0.171±0.030)之间比较,DK、ZK能明显高于LK(PDK-LK<0.05) (PZK-LK<0.05);三种不同剂量的中药组之间比较,DK、ZK与XK(0.169±0.030)之间比较能明显升高血中的补体C3的含量(PDK-XK<0.05) (PZK-XK<0.05)。C4:与MK(0.024±0.011)比较,DK(0.058±0.016)、ZK(0.050±0.011)、BK(0.059±0.019)均能升高血中补体C4(P<0.01);其中中药组与LK(0.040±0.016)之间比较,DK明显高于LK(PDK-LK<0.05);三种不同剂量的中药之间比较,DK与XK(0.040±0.019)比较能明显升高血中补体C4含量(PDK-XK<0.05)。3实验三:免疫组织化学染色黏附分子ICAM-1检测与MK(5.750±1.282)比较,DK(1.875±0.991)、ZK(2.125±0.991)、XK(2.625±0.916)、LK(2.750±1.165)、BK(1.125±0.991)均能明显降低肠黏膜阳性细胞的表达(P<0.01);其余各组之间比较无显著性差异(P>0.05)。结论:芪仙安肠方能明显改善UC大鼠一般状况和结肠组织形态;提高补体C3、C4含量,减少了血液中IgG、IgA免疫反应,从而降低了ICAM-1对肠黏膜的炎症反应,IgM治疗前后变化不明显;本方还能增强UC大鼠血清中红细胞C3bR的活性,减少红细胞免疫复合物(RCIC)在肠黏膜的大量沉积,从而减轻了其对结肠黏膜上皮细胞的损伤,与模型组比较具有非常显著性差异;还能调节CD4+细胞与CD8+细胞比例,使其保持平衡,减少两者比例失衡而导致的免疫功能的紊乱。尤其是芪仙安肠方大剂量组(DK)和中剂量组(ZK)对实验大鼠的治疗作用更为明显。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 研究论文 芪仙安肠方对大鼠溃疡性结肠炎免疫机制的实验研究
  • 引言
  • 第一部分 芪仙安肠方对溃疡性结肠炎大鼠一般状态、结肠组织形态学及红细胞免疫的影响
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 附表
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 第二部分 芪仙安肠方对溃疡性结肠炎大鼠T 细胞亚群及免疫球蛋白的影响
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 附表
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 第三部分 芪仙安肠方对溃疡性结肠炎大鼠ICAM-1 表达的影响
  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 附表
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 结论
  • 综述 中医药治疗溃疡性结肠炎的进展
  • 致谢
  • 个人简历
  • 相关论文文献

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