油菜菌核病菌不同菌株生物学特性比较及抗病性鉴定方法研究

论文摘要

采集四川雅安、乐山、绵阳、绵竹、宜宾和成都6个区域的油菜菌核病菌核,经纯化、鉴定为核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）,并培养在PDA培养基上保存备用。对不同菌株的生物学特性比较表明,在不同温度处理下,菌丝生长速度最快的是绵竹,最慢的是乐山;菌丝形成菌核最快的是绵阳,最慢的是宜宾。菌丝生长速度快的菌株,形成菌核也快;而形成菌核快的,其生长速度不一定快。在不同pH处理下,雅安分离的核盘菌耐酸性较强,绵阳的耐碱性较强,而绵竹的耐酸、碱性能力都比较强。菌核与菌丝的活性是不一致的,菌核活性最强的是雅安,而菌丝活性最强的是绵竹。来源于6个区域的核盘菌的致病力无明显分化。6个菌株菌丝生长的最适温度为25℃,最适温度范围为20℃—25℃;菌丝形成菌核的最适温度是25℃,最适温度范围是20℃—30℃;菌丝生长最适pH范围为pH4—pH7;最适培养基是麦麸培养基,其次是PDA培养基。在室内药效试验中,甲基托布津对核盘菌菌丝生长的抑制效果最佳,EC50为4.6,其次是福美双。多菌灵、百菌清和大生M—45的抑制效果均不理想。采用已报道的7种油菜菌核病抗性鉴定方法,在同一条件下对两个感病和两个抗病品种进行鉴定,比较这些鉴定方法。结果表明:草酸浸根（叶）法用于白菜型油菜鉴定效果不好;不同生育期的油菜对菌核病抗性有差异,抗性鉴定应该以花期鉴定为主,苗期鉴定为辅;在花期以麦粒叶腋接种、琼脂块叶腋接种和牙签茎干接种这3种方式做抗性鉴定,结果表明接种后发病程度依次为牙签＞麦粒＞琼脂块;3种花期接种方法与大田接种鉴定的结果呈显著正相关（r＞0.8000）,这3种方法均能有效反映抗、感品种的差异,其中花期牙签茎千接种法与大田接种鉴定法相关性达极显著水平（r=0.9140）。根据抗性鉴定方法比较的结果,选用花期牙签茎干接种法,以中油821为对照,对四川农业大学油菜研究中心G1自交系的44份油菜育种材料进行鉴定、筛选,得到12份高抗材料,其中有5份材料的抗性极显著高于对照,抗病率rr＞0.55。油菜苗期酶活性测定试验表明,油菜植株未接种核盘菌,POD酶与SOD酶（18小时内测定值）与品种抗性呈正相关;油菜植株接种核盘菌后,SOD酶与PAL酶活性与品种抗性呈正相关,且抗病品种的SOD酶和PAL酶活性上升得更快、更高。油菜防御酶活性在核盘菌接种前、后的变化是有区别的,抗（耐）菌核病品种未接种时的健株防御酶活性较高,是油菜抗菌核病的生理生化机制之一。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 1 前言
• 1.1 油菜菌核病概述
• 1.2 油菜菌核病研究现状
• 1.2.1 核盘菌生物学特性研究
• 1.2.2 核盘菌致病机理研究
• 1.2.3 油菜菌核病抗病性鉴定方法研究进展
• 1.2.4 核盘菌的多样性研究
• 1.3 油菜菌核病的防治现状
• 1.3.1 化学防治油菜菌核病
• 1.3.2 生物防治油菜菌核病
• 1.3.3 抗病育种防治油菜菌核病
• 1.3.3.1 油菜抗菌核病遗传研究
• 1.3.3.2 油菜抗菌核病种质筛选和利用情况
• 1.3.3.3 油菜抗菌核病育种情况
• 1.4 与油菜植株抗性相关的酶系
• 1.4.1 过氧化物酶
• 1.4.2 超氧物歧化酶
• 1.4.3 丙氨酸解氨酶
• 1.5 本研究的目的与意义
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料与设计
• 2.2 核盘菌的分离、纯化与鉴定
• 2.3 核盘菌生物学特性比较
• 2.3.1 温度对不同菌株的菌丝生长速度和菌核形成的影响
• 2.3.2 pH对不同菌株的菌丝生长速度的影响
• 2.3.3 不同菌株的菌核萌发出菌丝所需时间
• 2.3.4 不同培养基对菌丝生长速度和菌核形成的影响
• 2.3.5 不同菌株的菌丝侵染能力比较
• 2.4 含毒介质法测定杀菌剂对核盘菌的毒力
• 2.5 油菜菌核病抗病性鉴定方法比较
• 2.5.1 草酸浸根法
• 2.5.2 草酸浸叶法
• 2.5.3 苗期琼脂块离体叶片法
• 2.5.4 花期麦粒叶腋接种法
• 2.5.5 花期琼脂块叶腋接种法
• 2.5.6 花期牙签茎干接种法
• 2.5.7 大田接种鉴定法
• 2.7 抗、感品种酶活测定
• 2.7.1 过氧化物酶活性测定
• 2.7.2 超氧物歧化酶活性测定
• 2.7.3 苯丙氨酸解氨酶活性测定
• 3 结果与分析
• 3.1 核盘菌生物学特性比较
• 3.1.1 温度对不同菌株的菌丝生长速度和菌核形成的影响
• 3.1.2 pH对不同菌株的菌丝生长速度的影响
• 3.1.3 来源于不同区域的菌核萌发出菌丝所需时间
• 3.1.4 不同培养基对菌丝生长、菌核形成的影响
• 3.1.5 不同菌株的菌丝侵染力比较
• 3.2 杀菌剂毒力测定
• 3.3 油菜菌核病抗病性鉴定方法的比较
• 3.3.1 不同方法的鉴定结果
• 3.3.2 不同鉴定方法的相关性
• 3.4 抗源筛选
• 3.5 抗、感品种酶活性测定
• 3.5.1 过氧化物酶活性测定
• 3.5.2 超氧物歧化酶活性测定
• 3.5.3 苯丙氨酸解氨酶活性测定
• 4 结论与讨论
• 4.1 不同菌株的生物学特性比较
• 4.1.1 温度对不同菌株的菌丝生长和菌核形成的影响
• 4.1.2 pH对不同菌株的菌丝生长的影响
• 4.1.3 菌核萌发出菌丝的比较
• 4.1.4 培养基对核盘菌菌丝生长、菌核形成的影响
• 4.1.5 核盘菌菌丝的侵染力比较
• 4.2 杀菌剂的筛选
• 4.3 抗病性鉴定方法的比较
• 4.4 抗源的筛选
• 4.5 抗、感品种酶活变化
• 4.6 存在的问题及展望
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士期间发表论文