青藤碱对人外周血CD4～+T细胞增殖和细胞内Ca～（2+）浓度影响的体外研究

论文摘要

目的:通过研究青藤碱（Alkaloid sinomenine,SIN）对人外周血CD4+T细胞增殖和细胞内Ca2+浓度的体外影响,探讨SIN对人外周血CD4+T细胞免疫抑制作用的效应和分子生物学机制,为SIN在器官移植领域中的临床应用提供理论依据,以期为器官移植受者提供安全、有效和价格低廉的免疫抑制治疗方案。 方法:在衡阳市中心血站抽取一个健康人肘静脉血50ml,肝素（10U/ml）抗凝。用淋巴细胞分离液从血液标本中分离PBMC,并制成PBMC悬液。通过免疫磁珠分离法从PBMC悬液中分选CD4+T细胞。将CD4+T细胞用10%FCS RPMI—1640完全培养液在37℃、5%C02条件下培养。CD4+T细胞经终浓度为5ug/ml的PHA和终浓度为100U/ml的IL-2扩增7天后,均分为5组细胞培养并作以下处理:（1）、空白对照组:细胞培养液中不加入任何药物;（2）、CsA组:细胞培养液中加入终浓度为50ng/ml的CsA溶液;（3）、低浓度SIN组:细胞培养液中加入终浓度为10umol/L的SIN溶液;（4）、中浓度SIN组:细胞培养液中加入终浓度为200umol/L的SIN溶液;（5）、高浓度SIN组:细胞培养液中加入终浓度为1000umol/L的SIN溶液。6小时后,各组细胞培养液中加入终浓度为1ug/ml的抗CD3单克隆抗体。继续培养24小时后,每组细胞均分为3份细胞,对各份细胞进行检测:1)、MTT比色法检测细胞增殖;2)、FCM检测细胞内Ca2+浓度。 结果:1、MTT比色法测定OD值,计算细胞增殖抑制率（%）:（1）、空白对照组:0.00±0.00;（2）、CsA组:72.62±0.85;（3）、低浓度SIN组:2.25±1.58;（4）、中浓度SIN组:27.65±1.65;（5）、高浓度SIN组:40.12±1.08。高浓度SIN组、中浓度SIN组与其它各组比较均有显著性差异（P<0.05）;低浓度SIN组

论文目录

• 一、主要缩略语中英文索引（English Abbreviations Induces）
• 二、中文摘要（Chinese Abstract）
• 三、英文摘要（English Abstract）
• 四、正文（Text）
• 第一章（Chapter 1） 前言（Introduction）
• 第二章（Chapter 2） 材料和方法（Materials and Methods）
• 第三章（Chapter 3） 结果（Results）
• 第四章（Chapter 4） 讨论（Discussion）
• 第五章（Chapter 5） 结语（Conclusions）
• 五、参考文献（References）
• 六、综述（Review）
• 七、读研期间发表的论文（Theses）
• 八、致谢（Acknowledgements）