钙荧光探针论文-王恺,赵海鑫,李金亮,夏晴

钙荧光探针论文-王恺,赵海鑫,李金亮,夏晴

导读:本文包含了钙荧光探针论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:基因编辑钙探针,ATP,钙稳态,钙瞬变

钙荧光探针论文文献综述

王恺,赵海鑫,李金亮,夏晴[1](2019)在《构建钙荧光探针细胞用于探究胞浆和线粒体钙对ATP刺激的响应》一文中研究指出目的:构建表达基因编辑钙探针(GECIs)的细胞系HeLa-GECIs,探究细胞应答外界ATP刺激中钙离子在细胞内的响应和变化。方法:分别用能够直接通过荧光强度反映细胞胞浆内和线粒体内钙离子相对浓度的2种钙探针cyto-GCaMP6和4mt-GCaMP6感染HeLa细胞,获得2种表达钙离子探针的HeLa细胞系;在感染了2种腺病毒探针24 h后,用共聚焦荧光显微镜检测荧光探针在HeLa细胞内的表达情况;在表达2种钙探针的细胞的培养基中加入外源ATP,用Time-lapse成像动态观测技术观察HeLa细胞内钙离子对外环境中ATP的响应。结果:共聚焦荧光显微镜观察,确定95%以上的细胞表达了对应的钙离子指示荧光探针;Time-lapse成像动态观测技术观察发现,在细胞培养基中加入ATP后,细胞胞浆钙探针荧光强度瞬时(3~6 s)升至10倍,200 s后逐渐降低到基础水平;线粒体钙到达峰值(4倍)的时间稍滞后(5~8 s),并且回落更慢,300 s时至1.5倍。在ATP受体P2X7抑制剂A438079预处理的实验组,上述胞浆钙和线粒体钙浓度上升不明显。结论:构建了能在活体细胞内通过荧光探针实时监测钙离子响应胞外ATP刺激的细胞实验体系,为进一步深入探究ATP等危险信号导致细胞的炎性损伤机制奠定了基础。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2019年01期)

李丽丽[2](2012)在《新型罗丹明类钙荧光探针的设计及合成研究》一文中研究指出钙离子是保证生命能够正常运行的重要金属。从生命产生到细胞的各项功能行使都或多或少受到钙离子的调控。钙离子在细胞中的浓度变化与各种生理现象及病理现象息息相关,因此精确测量细胞内钙离子浓度及其转化已成为化学界、生物界及医学界的重要研究课题。众多分析细胞及亚细胞中钙离子浓度的技术也应运而生。荧光探针法在检测细胞内Ca2+浓度领域起到重要作用。目前国内使用的钙荧光试剂几乎全部从国外购进,价格昂贵,品种有限,且均存在不同缺点,使钙离子荧光指示剂的发展与制药、生物技术、生命科学的发展极不相应。罗丹明类荧光染料具有非常优良的光学性能,如消光系数较高,荧光量子产率比其他染料高,光学稳定性较好,在可见光激发下有相对长的发射波长等优点,使其成为一种理想的荧光发色团。氨乙基四羧酸结构对钙离子有非常好的螯合效果并具有专一性。因此设计合成的以罗丹明为荧光发色团,氨乙基四羧酸为螯合基团的新型钙离子荧光探针,应当是一类整体性能优良的罗丹明类细胞Ca2+荧光探针。本论文综述了已有各类荧光化合物的光学特性及钙离子荧光探针的研究进展。在此基础上,设计出新型罗丹明类钙离子荧光探针的拟合成方法。论文的研究内容主要包括:1.设计了以间氨基苯酚为原料,TS基团保护酚羟基,使氨基与不同取代基进行反应后脱除保护基,与邻苯二甲酸酐进行缩合反应生成罗丹明母环的合成路线。得到4个未见文献报道的罗丹明荧光探针中间体,并通过红外、核磁共振、高分辨质谱和元素分析等手段对新化合物结构进行了表征。2.研究了荧光关环产物的合成过程,探讨了反应机理,优化了反应条件。3.培养并测定了5个未见报道的中间体晶体结构并进行了分析研究。4.对合成的重要中间体的荧光性质进行了分析。(本文来源于《西北大学》期刊2012-06-30)

周晖,毛萌[3](2007)在《不同光激发钙荧光探针的性质、选择标准及测定过程的标准化》一文中研究指出目的:概括钙荧光探针的分类,选择钙荧光探针的基本思路以及细胞内钙测定的标准化。资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库2000-01/2006-12相关钙荧光探针方面的文献,检索词“calcium fluorescent indicators,calcium measurement”,限定文献语言种类为English。资料选择:对资料进行初审,选取包括钙荧光探针的文献,开始查找全文。纳入标准:与钙荧光探针及细胞内钙测定相关的文献。排除标准:重复研究、个案报告、综述、Meta分析的文献。资料提炼:共检索到103篇关于钙荧光探针及细胞内钙测定的文献,最终纳入30篇符合标准的文献。资料综合:钙荧光探针可分为定性探针及定量探针两类,定性探针多为可见光激发的单波长探针,其代表有Fluo3和Fluo4等,定量探针多为紫外激发的双波长探针,其代表为Fura2及Indo1等。选择钙荧光探针需考虑试验目的,探针进入细胞的方式,探针的离解常数及测定所用仪器等。测定细胞内钙时,应注重测定过程中的标准化,同时注意钙荧光探针测定过程中的潜在问题,避免混杂因素的干扰。本文主要综述如何选择钙荧光探针。结论:选择合适的钙探针,注意钙荧光探针测定过程中的标准化及其他潜在问题,可对细胞内钙离子浓度进行较为准确的测定。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2007年09期)

韩洁,贺怀贞,李剑利,史真[4](2006)在《细胞钙荧光探针前体的设计合成》一文中研究指出Calcium is one of the most vital elements in living cells; the variation of the concentration of calcium has a key relation to many physiological progresses, so to detect the concentration of calcium and its variation becomes increasing important. Fluorescence probes are excellent tools to analyze and clarify the roles of biomolecules in living cells, thus synthesizing novel calcium fluorescence probe raises a high attention. Recent efforts in our laboratory have been focused on designing and synthesizing novel calcium fluorescence probe precursor.5-formyl-5’-methyl-1,2-bis-(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetra-methyl acetate and it has been prepared from 2-nitrophenol and 6-nitro-m-cresol through five steps.(本文来源于《中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(上册)》期刊2006-07-01)

张小玲,阎宏涛[5](2005)在《新型钙荧光探针在H_2O_2对HL-60胞浆钙影响研究中的应用》一文中研究指出采用H2O2、黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶、H2O2/抗坏血酸/Fe2+(或H2O2/Fe2+)、H2O2和辣根过氧化酶(HRP)等不同活性氧产生体系,对自行合成的胞浆特异性钙荧光探针STDIn的活性氧耐受性进行了考察。以STDIn-AM为探针标记HL-60细胞,激光共聚焦技术检测单细胞内Ca2+-STDIn荧光强度的变化;探讨了不同浓度的H2O2对胞内Ca2+浓度变化的影响,从膜结构和生物信号传导的角度研究了氧自由基对培养细胞的生物效应。(本文来源于《分析科学学报》期刊2005年05期)

邵梅,王洪梅,刘志洪,沈萍,蔡汝秀[6](2005)在《钙荧光探针Fura-2/AM对大肠杆菌细胞的负载行为》一文中研究指出Fura-2/AM作为一类高效的钙离子荧光探针,在动物细胞中已得到较成功的应用,但在微生物细胞分析方面鲜见报道。该文系统研究了该探针的荧光光谱特征及其在大肠杆菌细胞内的负载行为,并考察了在大肠杆菌细胞中钙离子与Fura-2的结合情况。为利用其研究大肠杆菌等微生物细胞内钙离子浓度及钙离子跨膜行为奠定了基础。(本文来源于《微生物学报》期刊2005年05期)

钙荧光探针论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

钙离子是保证生命能够正常运行的重要金属。从生命产生到细胞的各项功能行使都或多或少受到钙离子的调控。钙离子在细胞中的浓度变化与各种生理现象及病理现象息息相关,因此精确测量细胞内钙离子浓度及其转化已成为化学界、生物界及医学界的重要研究课题。众多分析细胞及亚细胞中钙离子浓度的技术也应运而生。荧光探针法在检测细胞内Ca2+浓度领域起到重要作用。目前国内使用的钙荧光试剂几乎全部从国外购进,价格昂贵,品种有限,且均存在不同缺点,使钙离子荧光指示剂的发展与制药、生物技术、生命科学的发展极不相应。罗丹明类荧光染料具有非常优良的光学性能,如消光系数较高,荧光量子产率比其他染料高,光学稳定性较好,在可见光激发下有相对长的发射波长等优点,使其成为一种理想的荧光发色团。氨乙基四羧酸结构对钙离子有非常好的螯合效果并具有专一性。因此设计合成的以罗丹明为荧光发色团,氨乙基四羧酸为螯合基团的新型钙离子荧光探针,应当是一类整体性能优良的罗丹明类细胞Ca2+荧光探针。本论文综述了已有各类荧光化合物的光学特性及钙离子荧光探针的研究进展。在此基础上,设计出新型罗丹明类钙离子荧光探针的拟合成方法。论文的研究内容主要包括:1.设计了以间氨基苯酚为原料,TS基团保护酚羟基,使氨基与不同取代基进行反应后脱除保护基,与邻苯二甲酸酐进行缩合反应生成罗丹明母环的合成路线。得到4个未见文献报道的罗丹明荧光探针中间体,并通过红外、核磁共振、高分辨质谱和元素分析等手段对新化合物结构进行了表征。2.研究了荧光关环产物的合成过程,探讨了反应机理,优化了反应条件。3.培养并测定了5个未见报道的中间体晶体结构并进行了分析研究。4.对合成的重要中间体的荧光性质进行了分析。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

钙荧光探针论文参考文献

[1].王恺,赵海鑫,李金亮,夏晴.构建钙荧光探针细胞用于探究胞浆和线粒体钙对ATP刺激的响应[J].生物技术通讯.2019

[2].李丽丽.新型罗丹明类钙荧光探针的设计及合成研究[D].西北大学.2012

[3].周晖,毛萌.不同光激发钙荧光探针的性质、选择标准及测定过程的标准化[J].中国组织工程研究与临床康复.2007

[4].韩洁,贺怀贞,李剑利,史真.细胞钙荧光探针前体的设计合成[C].中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(上册).2006

[5].张小玲,阎宏涛.新型钙荧光探针在H_2O_2对HL-60胞浆钙影响研究中的应用[J].分析科学学报.2005

[6].邵梅,王洪梅,刘志洪,沈萍,蔡汝秀.钙荧光探针Fura-2/AM对大肠杆菌细胞的负载行为[J].微生物学报.2005

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