论文摘要
【目的】甲状腺肿瘤是最常见的内分泌肿瘤，由于病理类型较多，生物学行为的差异性较大，形态上难以区分肿瘤的良恶性，因此近来寻找肿瘤的分子标志物成为诊断病理学的一大热点。微小染色体维持蛋白5（minichromosome maintenance protein 5，Mcm5）和细胞分裂周期蛋白6（cell division cycle protein 6，Cdc6）是真核生物DNA复制的主要调控因子，它们均参与构成DNA前复制复合物（Prereplicative complexes，Pre-Rcs）。Mcm5是Mcm蛋白家族成员之一，它与其它5个高度同源的亚单位组成一个环形结构的具有解链酶活性的亲水性六聚体复合物，其作用有赖于中心结构域保守的三磷酸腺苷酶（ATPase）模体。Mcm蛋白复合物不仅是DNA复制起始所必需的要素，还参与DNA复制叉的延伸过程。此外，Mcm5蛋白在转录延伸中与RNA聚合酶Ⅱ（RNA polymeraseⅡ）协同作用，促进转录。Cdc6是庞大的ATP酶家族成员之一，在G1期与Cdc10依赖性的转录因子1（Cdc10 dependent transcript 1，Cdt1）协同作用，利于ATP依赖的Mcm蛋白复合物在DNA复制过程中的装载。Cdc6蛋白作为细胞周期中DNA复制的能量代谢酶，具有促进ATP结合与水解的作用。在正常细胞中，Mcm5和Cdc6蛋白在每个细胞周期中仅发生一次，细胞进入静止期或终末分化状态则不表达，在不典型增生细胞和多种肿瘤组织中检测到了其过度表达，因此，Mcm5和Cdc6可作为细胞增殖状态的特异性标志物。但目前关于两者在甲状腺肿瘤作用的报道较少，本实验通过检测Mcm5与Cdc6在甲状腺肿瘤组织中的表达，并与Ki67相比较，探讨两种蛋白在甲状腺肿瘤发生中的作用和辅助诊断价值。【方法】采用免疫组织化学法检测15例甲状腺腺瘤和49例甲状腺癌组织中Mcm5、Cdc6和Ki67蛋白的表达。49例甲状腺癌包括20例乳头状癌，13例滤泡癌，9例髓样癌，7例未分化癌。【结果】Mcm5在甲状腺未分化癌、髓样癌、乳头状癌细胞核中有阳性染色，核标记指数分别为29.14±12.32，10.11±6.51，2.60±2.11，滤泡癌和甲状腺腺瘤为阴性表达。Mcm5在甲状腺未分化癌、髓样癌、乳头状癌与甲状腺腺瘤间比较有显著差异性（P＜0.05）。甲状腺未分化癌、髓样癌、乳头状癌细胞核中显示Cdc6抗体阳性着色，核标记指数分别为14.71±9.47，5.33±4.90，1.55+1.47，滤泡癌和甲状腺腺瘤为阴性表达。Cdc6在甲状腺未分化癌、髓样癌、乳头状癌与甲状腺腺瘤间比较有显著差异性（P＜0.05）。Ki67在甲状腺未分化癌、髓样癌、乳头状癌、滤泡癌和甲状腺腺瘤细胞核中均有阳性染色，核标记指数分别为31.74±13.31，12.11±5.49，3.25±2.72，5.23±2.72，1.07+2.09。Ki67蛋白在甲状腺未分化癌、髓样癌、乳头状癌、滤泡癌与甲状腺腺瘤间比较有显著差异性（P＜0.05）。Mcm5、Cdc6及Ki67三者在甲状腺癌中的表达呈两两正相关。Mcm5、Cdc6及Ki67在淋巴结转移和未转移组间无显著差异性（P＞0.05）。【结论】Mcm5和Cdc6蛋白能反映甲状腺癌细胞的增生程度，是辅助诊断甲状腺未分化癌、髓样癌、乳头状癌的参考指标；联合检测Mcm5及Cdc6和Ki67三种蛋白，有助于区分甲状腺腺瘤与甲状腺未分化癌、髓样癌、乳头状癌；Mcm5、Cdc6及Ki67蛋白的表达与患者淋巴结转移无关。