论文题目: 机体氧化还原状态的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 病理学与病理生理学
作者: 王秋林
导师: 王树人
关键词: 氧化还原状态,谷胱甘肽
文献来源: 四川大学
发表年度: 2005
论文摘要: 机体不断地遭受内源性和外源性活性氧(ROS)的攻击,但在机体丰富的抗氧化防御系统的作用下,机体的氧化-抗氧化间维持恒定的氧化还原状态,以维持机体的内环境稳定。机体的氧化-抗氧化能力间平衡失调则会引起机体REDST出现向氧化或还原方向进行偏移,当这种偏移超过一定限度则通过氧化还原敏感机制对机体产生氧化损伤或还原性损伤,引起各种各样疾病的产生。目前多从机体抗氧化物质的量的改变以及蛋白、脂质、核酸等遭受氧化损伤产生的一些代谢产物的增多等来对氧化损伤进行评价,尚无有效评价机体的REDST的方法。本实验即针对这些问题展开研究。鉴于GSH/GSSG是机体一种重要的氧化还原对,与NADPH、Vit C、Vit E、Trx以及其它相关酶等组成完整的抗氧化的氧化还原网络,着重讨论在生理以及不同疾病状态下血浆中GSH/GSSG、NADPH/NADP~+氧化还原状态的变化。 首先,利用GSH、GSSG的生物化学特性,建立了一种新的测试条件对血浆中的GSH和GSSG进行荧光测试。利用DTT将GSSG还原为GSH,GSH的伯胺基和巯基与邻苯二甲醛(OPA)的两个醛基缩合成可发强荧光的物质异吲哚,从而运用荧光分光光度仪对血浆中的GSH以及GSSG进行定量。该方法准确,特异性高,回收较好,过程简捷。
论文目录:
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分: 血浆GSH测量方法
1 材料与方法
1．1 试剂
1．2 仪器
1．3 荧光波长的确定
1．4 制作GSH及GSSG的标准曲线
1．5 样品处理、贮存对测定结果的影响
1．6 回收及荧光强度稳定性试验
1．7 血浆中GSH及GSSG的测定
1．8 统计学处理
2 结果
2．1 测定条件的选择
2．2 GSH及GSSG的标准曲线
2．3 线性范围、检测限、精密度和准确度
2．4 样品的处理、贮存对测定结果的影响
2．5 样品测定
3 讨论
第二部分: 血浆NAOP+/NADPH的测量
1 材料与方法
1．1 仪器
1．2 试剂
1．3 测定方法
2 结果
2．1 测定条件的选择
2．2 标准曲线
2．3 线性范围、检测限、精密度和准确度
3 讨论
第三部分: 血浆中氧化还原状态的评价
1． 材料与方法
1．1 研究对象
1．2 试剂及配制方法
1．4 血浆中GSH和NADP的测量
1．5 氧化还原电势的计算
1．6 统计方法
2． 结果
2．1 健康人群GSH/ GSSG、NADP~+/NADPH
2．2 肿瘤患者GSH/GSSG、NADPH/NADP~+
2．3 COPD患者GSH/GSSG、NADPH/NADP~+
2．4 AP患者GSH/GSSG、NADP~+/NADPH
3． 讨论
3．1 氧化应激及其评价
3．2 血浆氧化还原状态与增龄间的关系
3．3 血浆氧化还原状态与肿瘤间的关系
3．4 血浆氧化还原状态与COPD间的关系
3．5 血浆氧化还原状态与AP间的关系
全文总结
参考文献
综述1: 氧化应激及其评价
综述2: 谷胱甘肽的测量及其意义
致谢
声明
发布时间: 2005-11-09
参考文献
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