论文摘要
目的:为深入研究增生性瘢痕的发病机理,用免疫组织化学方法分别检测CD90、Ⅰ、Ⅳ型胶原和TGF-βⅠ型、Ⅱ型受体在增生性瘢痕中心区、瘢痕边界区和正常皮肤组织中的表达水平,探讨与瘢痕异常增生相关的影响因素,并分析增生性瘢痕边界区中成纤维细胞CD90与TGF-βⅠ型、Ⅱ型受体表达的相关性和Ⅰ、Ⅳ型胶原与TGF-βⅠ型、Ⅱ型受体表达的相关性。方法:1、取手术切除的带有少量正常皮肤的增生性瘢痕组织21例,将组织标本固定、石蜡包埋,组织切片HE染色证实临床诊断后,分为增生性瘢痕中心区组、瘢痕边界区组、正常皮肤组,每组各21例。2、选取组织蜡块,根据HE染色、形态学观察确定典型病变部位,从每例标本中选取1个采样点,构建包括63点组织标本的芯片蜡块,阵列为9×7。3、从芯片蜡块中切取5张切片,应用免疫组织化学方法对组织芯片进行染色,对5张组织芯片分别检测CD90、Ⅰ、Ⅳ型胶原和TGF-βⅠ型、Ⅱ型受体及在增生性瘢痕中心区、瘢痕边界区和正常皮肤组织中的表达水平,将所得结果进行统计学分析。4、比较分析增生性瘢痕边界区组中成纤维细胞CD90与TGF-βⅠ型、Ⅱ型受体表达相关性和增生性瘢痕边界区组中Ⅰ、Ⅳ型胶原与TGF-βⅠ型、Ⅱ型受体表达的相关性。结果:1、构建增生性瘢痕的组织芯片,用于免疫组化检测和多因素分析。2、免疫组织化学染色显示21例增生性瘢痕组织中心区中17例有CD90阳性表达的成纤维细胞,21例瘢痕边界区组有13例阳性表达,21例瘢痕周围正常皮肤组织组只有4例阳性表达,增生性瘢痕中心区组与瘢痕边界区组相比无显著性差异(P>0.05),两组与正常皮肤组相比均有显著性差异(P<0.05)。3、Ⅰ型胶原在瘢痕中心区组及边界区组均有较高表达,与正常皮肤组相比有显著差异(P<0.05),增生性瘢痕中心区组及边界区组以Ⅰ型胶原为主,Ⅳ型胶原在瘢痕中心区组及正常皮肤组均较低表达,两组与瘢痕边界区组比较均有显著差异(P<0.05),瘢痕边界区组以Ⅳ型胶原为主。4、TGF-βⅠ型受体在增生性瘢痕边界区组中有较高程度表达,在增生性瘢痕组织中心区仅有少量表达,两组相比有显著性差异(P<0.05),且TGF-βⅡ型受体在增生性瘢痕中心区组和瘢痕边界区组中均有较高程度表达,两组相比无显著性差异(P>0.05)。而两者在瘢痕周围正常皮肤组织中仅有少量表达,与增生性瘢痕和瘢痕边界区组相比均有显著性差异(P<0.05)。5、增生性瘢痕边界区组中成纤维细胞CD90和TGF-βⅠ型、Ⅱ型受体表达具有正相关性。6、增生性瘢痕边界区组中Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原和TGF-βⅠ型受体具有相关性(P<0.05),Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原与TGF-βⅡ型受体也具有相关性(P<0.05)。结论:1、组织芯片用于多因素比较研究具有高效率、质控好的优点,可用于增生性瘢痕的相关研究。2、在增生性瘢痕中,CD90阳性表达的成纤维细胞可能是瘢痕异常增生的特异表型。3、增生性瘢痕组织中Ⅰ型和Ⅳ型胶原的合成及分布变化在瘢痕形成过程中起到重要作用。4、TGF-βⅠ型、Ⅱ型受体在增生性瘢痕中的表达增强,提示TGF-βⅠ型、Ⅱ型受体可能参与了增生性瘢痕的形成并起着重要的作用,故在预防和治疗增生性瘢痕中具有一定的临床意义,尤其是TGF-βⅠ型受体在瘢痕边界区表达增强,而且增生性瘢痕边界区的防治可能是临床防治工作的重点。5、增生性瘢痕边界区中成纤维细胞CD90和TGF-βⅠ型、Ⅱ型受体表达具有正相关性,其在瘢痕异常增生过程中可能存在一定的协同关系。6、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原和TGF-βⅠ受体、TGF-βⅡ受体可能在增生性瘢痕边界区中具有一定的协同作用。