叶酸靶向纳米复合物的制备及体内外MR成像实验研究

论文摘要

目的探讨叶酸靶向超顺磁性氧化铁-多巴胺-叶酸（superparamagnetic iron oxide-dopamine-folate,NP-DPA-FA）纳米复合物对叶酸受体（FR）阳性肝癌细胞的靶向性及利用MRI对其进行监测的可行性。方法①制备NP-DPA-FA纳米复合物。②对Bel 7402细胞进行普鲁士蓝染色及体外竞争抑制试验。③将NP-DPA-FA复合物与Bel 7402人肝癌细胞及HL 7702正常人肝细胞孵育2h后,进行普鲁士蓝染色及体外MR成像,观察其T2WI信号强度变化并计算信号强度变化率。结果普鲁士蓝染色显示Bel 7402细胞内可见大量铁颗粒沉积,HL 7702细胞内铁颗粒沉积少见。Bel 7402细胞抑制竞争试验显示细胞内铁颗粒极少。铁浓度不同的NP-DPA-FA复合物分别与Bel 7402细胞及HL 7702细胞孵育后,MRI显示Bel 7402细胞的信号强度随NP-DPA-FA复合物的铁浓度升高而明显减低,HL 7702细胞信号强度减低相对不明显。两种细胞信号变化率分别为-22.98%、-40.01 %、-68.85%、-91.36%、-96.18%与-4.40%、-5.51%、-17.06%、-33.54%、-39.63%。结论叶酸介导的磁性纳米颗粒复合物对Bel 7402人肝癌细胞具有靶向性,应用MRI可对其进行监测。目的研究叶酸受体介导的靶向对比剂四氧化三铁-多巴胺-葡聚糖-叶酸（SPIO-DPA-Dextran-FA）对叶酸受体阳性的肿瘤MR成像规律,探讨该对比剂MR靶向诊断荷人肝癌裸鼠模型的可行性。方法①氯化铁和油酸钠回流合成油酸铁。②油胺作为还原剂,油酸钠作为表面活性剂,在适宜的条件下油酸铁混合物热分解成磁性氧化铁纳米粒子,连接上叶酸得到肿瘤靶向对比剂SPIO-DPA-Dextran-FA。③将5-6周龄无特定病原体（SPF）级BALB/C裸小鼠皮下接种人肝癌细胞作为动物模型;将12只人肝癌裸小鼠模型采用完全随机法分成实验组（n=6）与对照组（n=6）,前者经尾静脉注射靶向SPIO-DPA-Dextran-FA对比剂0.2 ml,后者经尾静脉注射相同剂量的非靶向对比剂四氧化三铁-多巴胺-葡聚糖（SPIO-DPA-Dextran）,注射后扫描时间点选择为0.5h、1h、2h、4h、8h、12h、18h、24h。测量各时间点瘤体及肌肉信号强度值,并计算各时间点的信噪比。结果①电镜下,合成的纳米复合物形态均一,分散性较好,直径约14nm。②实验组和对照组瘤体的信号测定值具有统计学意义（F=146.09,P<0.01）,实验组和对照组肌肉的信号测定值无统计学意义（F=3.15, P>0.05）。实验组和对照组的CNR计算值具有统计学意义（F=351.39,P<0.01）。实验组瘤体强化峰值出现在18-24h时间点,对照组瘤体强化峰值出现在0.5-2h时间点。结论SPIO-DPA-Dextran-FA对比剂对荷人肝癌裸鼠模型具有一定的靶向性。利用MR可进行监测,有效地实现MR靶向诊断。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 叶酸靶向超顺磁性氧化铁-多巴胺-叶酸纳米复合物的体外MR成像实验研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第二部分 叶酸靶向对比剂的制备及其对荷人肝癌裸鼠的MR 成像研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 小结
• 参考文献
• 结论
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 英文缩略词表
• 攻读硕士学位期间公开发表的论文
• 致谢