湖南省松材线虫病疫情及松褐天牛生物学特性研究

论文摘要

松材线虫病是我国当前森林的头号病害,它是松材线虫通过松褐天牛在健康松树上危害后侵入松树,在短时间内引起松树枯死的一种毁灭性病害。松材线虫在日本1905年首次发现,我国于1982年在江苏南京发现至今已在全国13个省100多个县（区）发生,发病面积超过8.7×104hm2,引起了全社会广泛关注和有关方面的高度重视。本研究以湖南松林地区为基点,对松材线虫主要传播媒介——松褐天牛在湖南的生物学特性、松材线虫病疫区松树春季感病状况、治理区治理后病原数量情况、新发生区病原的鉴定及其rDNA区序列进行了研究,主要内容如下:湖南松褐天牛生物学特性研究。本研究采用野外观察和室内饲养相结合的方法,表明松褐天牛在湖南大部分地区是1a发生1代,靠近广东的郴州地区有12.6%的1a2代,各虫态的发生情况在湖南各地区有所差异,在林间最早发现羽化的是郴州北湖区,时间为4月26号,最迟发现的是张家界永定区,时间为5月25号,韶山市为5月2号,古丈县为5月5号,沅江市为5月11号,林间羽化盛期最早的是郴州北湖区时间应为5月中下旬至六月上旬,林间羽化盛期较迟的是永定区,为6月上中旬;松褐天牛成虫捕获量与温度、最高与最低温差、相对湿度以及降水等均有一定的相关性,相关系数分别为0.017、-0.022、-0.103、-0.131;松褐天牛在湖南最喜欢取食的松树是马尾松,最喜欢产卵和刻槽的松树也是马尾松。松材线虫病发生区春季枯死枝条的感病状况。研究发现在松材线虫病发生区,有一定比例春季枯死枝条中含有松材线虫:10年左右的含松材线虫比例为15.2%,15年左右的为38.5%,而20年左右的仅为10.0%,超过22年的所含数量更少,枯死枝条中含有松材线虫平均比例约为21.2%。另有一定比例的枯死枝条中含有拟松材线虫或其它线虫,而大部分含松材线虫的枯死枝条中含其它线虫,并且含松材线虫的枯死枝条中无一例外受到松褐天牛危害。治理区病原数量变化的调查研究。研究表明,在湖南治理区,林内携带松材线虫松褐天牛的比例为22.0%,褐天牛成虫携带松材线虫以中期6月份携带量最大,平均每头478条;初期5月份最少,平均为331条;后期7月份平均380条。而在室内携带松材线虫松褐天牛的比例为25.5%,松褐天牛成虫携带松材线虫以中期6月份携带量最大,平均每头625条;后期7月份最少,平均为358条;初期5月份平均452条。松褐天牛携带松材线虫的数量和比率都与以前国内外报道的要少得多,这表明湖南通过工程治理的模式防治松材线虫病取得了比较满意的成绩。湖南临湘松材线虫病病原鉴定及病源分析。通过形态鉴定和实时荧光定量PCR分子技术两种方法对临湘市疑似松材线虫进行了鉴定,确认了湖南临湘松材线虫病,对其rDNA区序列进行分析表明湖南临湘疫情的发生与江苏南通地区疫情关系密切。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1 松材线虫病及其危害
• 1.1 松材线虫病的危害
• 1.2 松材线虫的分布
• 1.2.1 全球的分布
• 1.2.2 中国的分布
• 1.2.3 湖南的分布
• 1.3 松材线虫病的症状
• 2 松材线虫的分类地位及生物学特性
• 2.1 松材线虫的形态特征
• 2.2 松材线虫的分类地位
• 2.3 松材线虫的生物学特性
• 2.4 松材线虫的寄主和寄生松科植物的线虫
• 3 松褐天牛携带松材线虫的情况及传播松材线虫的过程
• 3.1 松材线虫的传播途径
• 3.2 携带松材线虫的昆虫
• 3.3 松褐天牛携带松材线虫部位及携带量
• 3.4 松褐天牛传播松材线虫的过程
• 4 松褐天牛的生物学特性
• 4.1 分类地位、寄主及分布
• 4.2 松褐天牛世代以及生活史
• 4.3 松褐天牛各虫态形态特征
• 4.4 松褐大牛的危害
• 5 松材线虫的分子检测方法
• 6 松材线虫病的综合治理
• 6.1 加强检疫
• 6.2 营林措施
• 6.3 引诱剂诱杀
• 6.4 药剂防治
• 6.5 生物防治
• 第二章 松褐天牛生物学特性研究
• 1 材料与方法
• 1.1 主要材料
• 1.2 方法
• 1.2.1 松褐天牛生活史的观察
• 1.2.2 野外林间成虫动态的观察
• 1.2.3 松褐天牛成虫食性的观察
• 1.2.4 松褐天牛成虫产卵对诱木的选择
• 2 结果与分析
• 2.1 松褐天牛生活史
• 2.2 林间各监测点松褐天牛成虫诱捕量比较
• 2.3 林间松褐天牛成虫发生动态
• 2.4 松褐天牛羽化与气候因子的关系
• 2.5 松褐天牛成虫食性的研究
• 2.6 松褐天牛成虫产卵对诱木的选择
• 3 讨论
• 第三章 松材线虫病发生区春季枯死枝条的感病状况研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 2.1 松材线虫病发生区春季枯死枝条的感病状况
• 2.2 枯死枝条中松褐天牛危害比例与松材线虫比例的关系调查
• 2.3 枯死松枝上其它害虫危害情况调查
• 3 讨论
• 第四章 治理区病原数量的调查研究
• 1 材料与方法
• 1.1 试验地点
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 室内松褐天牛不同羽化期携带松材线虫数测定
• 1.2.2 林内松褐天牛不同羽化期携带松材线虫数测定
• 1.2.3 诱木中松材线虫数量测定
• 2 结果
• 2.1 室内松褐天牛不同羽化期携带松材线虫数
• 2.2 林内诱捕的松褐天牛不同羽化期携带松材线虫数
• 2.3 诱木中含松材线虫数与从中羽化出天牛携带松材线虫数测定
• 3 讨论
• 第五章 湖南临湘松材线虫病病原鉴定及病源分析
• 1 材料与方法
• 1.1 枯死松树的症状观察
• 1.2 样本采集及处理
• 1.3 线虫纯化及培养
• 1.4 主要试剂及配制
• 1.5 形态学鉴定
• 1.6 实时荧光定量 PCR技术分子鉴定
• 1.6.1 材料
• 1.6.2 主要仪器设备
• 1.6.3 线虫DNA的提取
• 1.6.4 引物及探针
• 1.6.5 实时荧光PCR反应
• 1.7 线虫rDNA区基因序列测定
• 1.7.1 材料
• 1.7.2 主要仪器及试剂
• 1.7.3 线虫DNA的提取
• 1.7.4 扩增rDNA区的特异性引物
• 1.7.5 rDNA区基因扩增
• 1.7.6 rDNA区序列测定
• 1.7.7 DNA序列分析与处理
• 2 结果
• 2.1 病害症状
• 2.2 形态学观察及测量
• 2.3 分子生物学鉴定
• 2.4 rDNA区特异性扩增结果
• 3 讨论
• 第六章 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简历