蜂毒肽毒杀作物病原菌机理和植生效应

论文摘要

研究了蜂毒肽对17 种致病菌和农作物病原菌的抑菌谱及其抑菌机理,并测定了蜂毒肽对农作物生理指标及防御系统酶活性的影响。结果表明:蜂毒肽抑菌谱广,对革兰氏阳性和革兰氏阴性致病菌及多种农作物病原细菌都有抑制作用,对农作物病原真菌的孢子和菌丝体的生长也有抑制作用。抑菌曲线表明蜂毒肽快速毒杀菌体;SDS-PAGE 表明在蜂毒肽作用下,白菜软腐病菌菌体内的蛋白表达并没有特异性的变化;透射电镜观察,蜂毒肽作用下白菜软腐菌的菌体表面上出现孔洞,菌体裂解;扫描电镜观察,蜂毒肽对白菜软腐病菌的菌体表面结构造成破坏,在菌体细胞膜上打孔,使菌体皱缩裂解。投射和扫描电镜观察蜂毒肽作用番茄叶霉病菌孢子,发现菌体细胞质固缩,质壁分离,菌体变形以至死亡,但在细胞表面未见有孔洞出现,说明蜂毒肽对真核生物和原核生物的抑菌作用是不同的。实验还发现蜂毒肽对农作物生理指标的影响具有普遍性,低浓度的蜂毒肽对细胞中的叶绿素、可溶性糖、核酸及蛋白质含量均有一定促进作用,高浓度时有抑制作用,但影响都很微弱（t 检验p>0.05）。蜂毒肽对植物防御系统酶具有诱导效应,玉米POD 同工酶的研究进一步表明蜂毒肽对其有明显影响:而且对不同品种玉米POD 酶的作用不尽相同,表现了品种间的特异性。

论文目录

• 摘要
• 第一部分 文献综述
• 1 化学农药使用现状
• 2 生物农药的研究和应用进展
• 2.1 防治虫害的生物农药
• 2.1.1 微生物源杀虫剂
• 2.1.2 植物源杀虫剂
• 2.2 防治病害的生物农药
• 2.3 防治杂草的生物农药
• 2.4 植物生长调节剂
• 2.5 生物农药存在的问题以及应对策略
• 3 蜂毒肽综述
• 3.1 蜂毒肽的结构
• 3.2 蜂毒肽基因的药理作用及临床应用
• 3.2.1 药理作用
• 3.2.2 临床应用
• 3.3 蜂毒肽的获得
• 3.3.1 天然蜂毒肽的合成
• 3.3.2 现有制备蜂毒肽的方法及其存在问题
• 3.3.3 蜂毒肽的基因工程
• 3.4 蜂毒肽作用的分子生物学机理
• 3.4.1 膜裂解作用
• 3.4.2 作用于蛋白
• 3.4.3 离子的调节作用
• 3.5 蜂毒肽研究的展望
• 3.5.1 蜂毒肽的应用前景
• 3.5.1.1 医药上的应用
• 3.5.1.2 作为农药的潜力
• 3.5.1.3 膜研究工具
• 3.5.2 现有研究存在的问题及解决方式
• 4 本论文的意义
• 第二部分 蜂毒肽抑菌作用研究
• 1 实验材料
• 1.1 试剂
• 1.2 供试菌株
• 1.2.1 致病菌
• 1.2.2 农作物病原菌
• 1.3 微生物培养基
• 2 主要仪器
• 3 实验方法
• 3.1 菌种的活化培养
• 3.2 牛津杯法
• 3.2.1 细菌
• 3.2.2 真菌
• 3.3 液体倍比稀释法
• 4 结果与分析
• 4.1 蜂毒肽对几种致病菌的抑菌效果
• 4.2 蜂毒肽对农作物病原菌的抑菌效果
• 5 讨论
• 第三部分 蜂毒肽抑菌机理研究
• 1 实验材料
• 1.1 试剂
• 1.2 供试菌株
• 2 主要仪器
• 3 实验方法
• 3.1 菌种的活化培养
• 3.2 蜂毒肽作用白菜软腐病菌抑菌曲线的绘制
• 3.3 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分析
• 3.4 透射电镜观察
• 3.5 扫描电镜观察
• 4 结果与分析
• 4.1 蜂毒肽对白菜软腐病菌生长的影响
• 4.2 蜂毒肽对白菜软腐病菌蛋白表达的影响
• 4.3 白菜软腐病菌电镜观察
• 4.3.1 透射电镜观察
• 4.3.2 扫描电镜观察
• 4.4 番茄叶霉病菌电镜观察
• 4.4.1 透射电镜观察
• 4.4.2 扫描电镜观察
• 5 讨论
• 第四部分 蜂毒肽对农作物植生效应的研究
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 2.1 喷施蜂毒肽稀释液
• 2.2 蜂毒肽稀释液浸种
• 2.3 几项生理指标的测定
• 2.4 几种防御系统酶的提取及其活性测定
• 2.4.1 酶液的提取
• 2.4.2 酶活的测定
• 2.5 POD 同工酶电泳分析
• 3 结果与分析
• 3.1 喷施蜂毒肽稀释液对作物幼苗生理指标的影响
• 3.2 蜂毒肽稀释液浸种对作物种子萌发植生苗生理植标的影响
• 3.3 蜂毒肽稀释液对玉米防御系统酶的影响
• 3.3.1 PAL
• 3.3.2 POD
• 3.3.3 PPO
• 3.3.4 SOD
• 3.4 蜂毒肽对玉米不同品种 POD 同工酶谱的影响
• 4 讨论
• 结论
• Abstract
• 参考文献
• 致谢