本文主要研究内容
作者赵谦（2019）在《猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗的研制》一文中研究指出：猪链球菌病是由猪链球菌(Streptococcus suis,SS)引起的以猪的脑膜炎、败血症、关节炎等临床症状为特征的细菌性传染病。副猪嗜血杆菌病(也称为格拉泽氏病)是由副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)引起的以猪的脑膜炎、多发性浆膜炎、心包炎和关节炎为特征的细菌性传染病。二者在临床上常见混合感染,给养猪业造成了巨大损失。疫苗是提倡无抗养殖的关键环节,猪链球菌和副猪嗜血杆菌血清型众多,传统的灭活苗型间交叉保护性差,随着多种免疫原性好的抗原蛋白的发现,亚单位疫苗逐渐受到人们的重视。细菌表面展示技术已被证实能将较大的外源片段展示于菌体表面且保持片段生物学活性。本研究的目的在于获得一种基于细菌表面展示的高效、廉价、广谱的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗,为细菌疫苗的研发提供新思路。本研究构建了重组表面展示质粒pMD-INP-CdtB-OppA、pMD-INP-AfuA-OppA2、pMD-INP-MRP、pMD-INP-AfuA、pMD-INP-OppA2、pMD-INP-CdtB、pMD-INP-OppA,并转入E.coli BL21(DE3),通过亚细胞组分分离定位、免疫电镜实验验证了这8个重组的表面展示质粒能将重组蛋白AfuA-OppA2、CdtB-OppA、MRP、SLY、AfuA、CdtB、OppA2、OppA展示于E.coli BL21(DE3)的菌体表面。将菌体灭活后进行蛋白定量按比例混合并将混合后的菌液与ISA201VG乳化制成二联亚单位疫苗,添加纯化蛋白二联亚单位疫苗组、二联灭活苗组和对照组,在二次免疫小鼠14d后,用副猪嗜血杆菌血清5型HN10株、血清13型ZD12株和猪链球菌血清2型M126株、血清9型GZ2株以绝对致死剂量分别对小鼠腹腔注射攻毒。结果显示,表面展示HPS融合抗原蛋白AfuA-OppA2、CdtB-OppA的亚单位疫苗I对攻副猪嗜血杆菌血清5型HN10株、血清13型ZD12株的小鼠保护率为(80%、80%),表面展示HPS抗原蛋白AfuA、CdtB、OppA2、OppA的二联疫苗Ⅱ对攻副猪嗜血杆菌血清5型HN10株、血清13型ZD12株的小鼠保护率为(90%、60%),证明将蛋白融合后再进行表面展示策略的可行性。同时,二者对攻HPS小鼠的保护效果优于灭活苗(80%、60%),与纯化蛋白亚单位疫苗基本相当(90%、60%);含SS经典抗原蛋白MRP、SLY的表面展示疫苗对攻SS血清2型M126株、血清9型GZ2株的小鼠的保护率为(50%、90%),低于纯化蛋白亚单位疫苗(100%、80%),但高于灭活苗(50%、60%)。表面展示疫苗刺激小鼠机体产生细胞因子及抗体水平均与纯化蛋白亚单位疫苗相当,其简单的制作过程展现出很好的应用前景。
Abstract
zhu lian qiu jun bing shi you zhu lian qiu jun (Streptococcus suis,SS)yin qi de yi zhu de nao mo yan 、bai xie zheng 、guan jie yan deng lin chuang zheng zhuang wei te zheng de xi jun xing chuan ran bing 。fu zhu shi xie gan jun bing (ye chen wei ge la ze shi bing )shi you fu zhu shi xie gan jun (Haemophilus parasuis,HPS)yin qi de yi zhu de nao mo yan 、duo fa xing jiang mo yan 、xin bao yan he guan jie yan wei te zheng de xi jun xing chuan ran bing 。er zhe zai lin chuang shang chang jian hun ge gan ran ,gei yang zhu ye zao cheng le ju da sun shi 。yi miao shi di chang mo kang yang shi de guan jian huan jie ,zhu lian qiu jun he fu zhu shi xie gan jun xie qing xing zhong duo ,chuan tong de mie huo miao xing jian jiao cha bao hu xing cha ,sui zhao duo chong mian yi yuan xing hao de kang yuan dan bai de fa xian ,ya chan wei yi miao zhu jian shou dao ren men de chong shi 。xi jun biao mian zhan shi ji shu yi bei zheng shi neng jiang jiao da de wai yuan pian duan zhan shi yu jun ti biao mian ju bao chi pian duan sheng wu xue huo xing 。ben yan jiu de mu de zai yu huo de yi chong ji yu xi jun biao mian zhan shi de gao xiao 、lian jia 、an pu de zhu lian qiu jun bing -fu zhu shi xie gan jun bing er lian ya chan wei yi miao ,wei xi jun yi miao de yan fa di gong xin sai lu 。ben yan jiu gou jian le chong zu biao mian zhan shi zhi li pMD-INP-CdtB-OppA、pMD-INP-AfuA-OppA2、pMD-INP-MRP、pMD-INP-AfuA、pMD-INP-OppA2、pMD-INP-CdtB、pMD-INP-OppA,bing zhuai ru E.coli BL21(DE3),tong guo ya xi bao zu fen fen li ding wei 、mian yi dian jing shi yan yan zheng le zhe 8ge chong zu de biao mian zhan shi zhi li neng jiang chong zu dan bai AfuA-OppA2、CdtB-OppA、MRP、SLY、AfuA、CdtB、OppA2、OppAzhan shi yu E.coli BL21(DE3)de jun ti biao mian 。jiang jun ti mie huo hou jin hang dan bai ding liang an bi li hun ge bing jiang hun ge hou de jun ye yu ISA201VGru hua zhi cheng er lian ya chan wei yi miao ,tian jia chun hua dan bai er lian ya chan wei yi miao zu 、er lian mie huo miao zu he dui zhao zu ,zai er ci mian yi xiao shu 14dhou ,yong fu zhu shi xie gan jun xie qing 5xing HN10zhu 、xie qing 13xing ZD12zhu he zhu lian qiu jun xie qing 2xing M126zhu 、xie qing 9xing GZ2zhu yi jue dui zhi si ji liang fen bie dui xiao shu fu qiang zhu she gong du 。jie guo xian shi ,biao mian zhan shi HPSrong ge kang yuan dan bai AfuA-OppA2、CdtB-OppAde ya chan wei yi miao Idui gong fu zhu shi xie gan jun xie qing 5xing HN10zhu 、xie qing 13xing ZD12zhu de xiao shu bao hu lv wei (80%、80%),biao mian zhan shi HPSkang yuan dan bai AfuA、CdtB、OppA2、OppAde er lian yi miao Ⅱdui gong fu zhu shi xie gan jun xie qing 5xing HN10zhu 、xie qing 13xing ZD12zhu de xiao shu bao hu lv wei (90%、60%),zheng ming jiang dan bai rong ge hou zai jin hang biao mian zhan shi ce lve de ke hang xing 。tong shi ,er zhe dui gong HPSxiao shu de bao hu xiao guo you yu mie huo miao (80%、60%),yu chun hua dan bai ya chan wei yi miao ji ben xiang dang (90%、60%);han SSjing dian kang yuan dan bai MRP、SLYde biao mian zhan shi yi miao dui gong SSxie qing 2xing M126zhu 、xie qing 9xing GZ2zhu de xiao shu de bao hu lv wei (50%、90%),di yu chun hua dan bai ya chan wei yi miao (100%、80%),dan gao yu mie huo miao (50%、60%)。biao mian zhan shi yi miao ci ji xiao shu ji ti chan sheng xi bao yin zi ji kang ti shui ping jun yu chun hua dan bai ya chan wei yi miao xiang dang ,ji jian chan de zhi zuo guo cheng zhan xian chu hen hao de ying yong qian jing 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国农业科学院的赵谦，发表于刊物中国农业科学院2019-07-05论文，是一篇关于猪链球菌病论文,副猪嗜血杆菌病论文,表面展示论文,二联亚单位疫苗论文,免疫保护效果论文,中国农业科学院2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国农业科学院2019-07-05论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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