大鼠视网膜再灌注损伤致细胞凋亡的内质网应激机制研究

论文摘要

目的：探讨视网膜缺血再灌注（RIR）损伤致细胞凋亡的内质网应激（ERS）机制。 方法：①建立大鼠RIR模型SD大鼠随机均分为对照组和RIR组，采用前房高压灌注（110 mmHg×60min）的方法建立大鼠RIR模型，应用HE染色观察视网膜组织形态学改变，采用TUNEL法检测视网膜细胞凋亡的情况。 ②RIR损伤对视网膜ERS标志分子BiP和XBP-1表达的影响SD大鼠随机分成对照组和RIR组（各含再灌注后3 h、6 h、12 h、24 h和72 h共5个亚组，每亚组6只）。应用半定量RT-PCR方法检测BiP mRNA的表达水平。应用免疫组织化学方法检测BiP和XBP-1的蛋白表达。 ③BiP反义寡核苷酸对再灌注损伤中细胞凋亡的影响玻璃体腔内注射FAM标记的BiP反义寡核苷酸，用荧光显微镜观察其转染情况；SD大鼠随机均分为RIR组、BiP反义组和BiP错义组，于再灌注后12 h、24 h和7 d处死（每亚组6只），用免疫组织化学方法检测视网膜BiP蛋白的组织表达，用TUNEL检测视网膜细胞凋亡，HE染色观察RIR 7 d后大鼠视网膜组织的损伤情况。 ④RIR和BiP反义寡核苷酸对促凋亡分子CHOP和促存活分子GADD34转录的影响120只SD大鼠随机分成对照组、RIR组、BiP错义组和BiP反义组，分别包括再灌注后3 h、6 h、12 h、24 h和72h共5个亚组，每亚组6只。用半定量RT-PCR方法检测CHOP和GADD34的转录表达。 结果：①大鼠RIR模型及视网膜细胞凋亡情况Ⅰ．可以清楚观

论文目录

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• 英文摘要
• 缩略词
• 前言
• 第一章 大鼠视网膜再灌注损伤模型的建立及细胞凋亡的检测
• 1.引言
• 2.材料和方法
• 3.结果
• 4.讨论
• 5.结论
• 第二章 RIR损伤对大鼠视网膜ERS标志分子BIP和XBP-1表达的影响
• 1.引言
• 2.材料和方法
• 3.结果
• 4.讨论
• 5.结论
• 第三章 反义BIP对大鼠RIR损伤的影响
• 1.引言
• 2.材料和方法
• 3.结果
• 4.讨论
• 5.结论
• 第四章 大鼠RIR损伤中ERS致细胞凋亡的可能机制
• 1.引言
• 2.材料和方法
• 3.结果
• 4.讨论
• 5.结论
• 总结
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读期间发表的论文