论文摘要
中药质量的评价和控制一直是中药现代化研究的难点和热点,现行的“成分论”中药质量评价模式和方法,不仅难以有效地控制中药的质量,更难以反映其有效性和安全性。为寻求解决中药质量评价和控制问题的新突破,本文以临床常用且物质基础相对明确的含小檗碱类中药为模式药,借鉴生物制剂质量管理模式,探索建立以生物评价为核心手段的中药品质评价模式与方法,以补充和完善现行的中药质量评价与控制体系。目的:本研究探索建立以生物评价为核心手段的含小檗碱类中药品质评价方法,以补充和完善现行的中药质量评价与控制体系。方法:1.采用RP-HPLC法,对比分析了黄柏、关黄柏、黄连和三颗针样品中小檗碱等三种生物碱类成分含量并建立化学指纹图谱。2.采用管碟法和生物热动力学法对比考察含小檗碱类中药抗菌活性的差异性,初步建立基于管碟法和生物热动力学法的中药抑菌效价检测方法。结果:1.生物碱类成分含量测定和化学指纹图谱能客观表征含小檗碱类中药化学特征信息的差异性,在此基础上建立了其化学品质模式识别方法,结果表明化学特征信息在一定程度上能较好地用于含小檗碱类中药的品质评价和控制。2.参照物盐酸小檗碱和供试品含小檗碱类中药在一定浓度范围内,其剂量与抑菌圈直径D及第二指数生长期达峰时间Tmax2呈现良好的量效关系（r＞0.99）,说明管碟法和生物热动力学法可作为客观有效的效价检测手段用于含小檗碱类中药的生物评价和控制。暂定黄柏、关黄柏、黄连和三颗针药材生物效价下限值分别为70U/g、15U/g、440U/g和30U/g,可信限率不得超过10%。3.综合分析试验结果的关联性,分别进行了化学组分信息-生物效价信息、生物效价信息-生物效价信息的相关性分析,结果显示:指标成分与生物效价信息表达之间存在较为显著的正相关关系（相关系数r=0.8517,P＜0.01）;管碟法效价信息与生物热动力学效价信息之间具有良好的相关性和一致性（相关系数r=0.9861,P＜0.01）,提示两种生物效价检测方法可作为现行化学指标成分评价方法的补充和完善,共同用于对含小檗碱类中药品质的评价和控制。4.综合分析不同评价方法,分别进行了化学分析与生物评价方法的比较、不同生物效价检测方法的比较。结果显示:生物评价方法可应用于含小檗碱类中药品质评价,是对其化学分析方法的补充和完善;生物热动力学法和管碟法均可用于中药抑菌效价的检测。初步构建了含小檗碱类中药品质生物评价和控制体系,从药典常规、化学组分、生物效价等方面对其品质评价进行把关,其中生物效价检测方法是其品质评价的核心内容。结论:所建立的中药品质生物评价方法已初步显示出在含小檗碱类中药品质评价中的作用和价值,该方法也能为其他物质基础不明确的中药质量控制和评价提供新的思路和技术参考。创新点:本文以含小檗碱类中药为研究对象,首次采用管碟法和生物热动力学法进行了其抑菌效价的检测,初步建立了含小檗碱类中药品质的生物评价方法,为补充和完善现行的中药质量评价与控制体系提供了思路和方法。