血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1对THP-1单核巨噬细胞源泡沫细胞MMP-9表达的影响及辛伐他汀的干预作用

论文摘要

背景急性冠脉综合征临床事件的发生2/3—3/4是由于不稳定斑块纤维帽破裂所致。巨噬细胞是不稳定斑块的主要细胞成分,它分泌的基质金属蛋白酶（MMPs）导致细胞外基质降解纤维帽变薄破裂,MMP-9是其中重要一员。在各种炎性因子及氧化应激作用下斑块中MMP-9分泌增多,ox-LDL是主要刺激因子。LOX-1作为近几年新发现的ox-LDL特异受体,被认为是介导ox-LDL致泡沫细胞形成及炎性因子、MMPs分泌使斑块不稳定破裂的重要因素。但目前的研究多集中在内皮细胞。巨噬细胞源泡沫细胞作为不稳定斑块中分泌MMP-9的主要成分,探讨其LOX-1与MMP-9mRNA表达之间的关系对阐明LOX-1受体在急性冠脉综合征发生的作用具有重要意义,从而为临床抗动脉粥样硬化稳定斑块治疗提供新思路。近几年他汀类药物在抗动脉粥样硬化治疗中的非调脂抗炎作用越来越受到关注。很多研究已证实他汀除可以有效的降胆固醇作用外,尚具有改善内皮功能,抑制平滑肌增殖迁移,抗氧化,抑制炎性介质表达,稳定斑快等多项非调脂抗炎作用,但具体机制尚不明确。我们通过研究辛伐他汀对巨噬细胞源泡沫细胞LOX-1表达的影响,探讨他汀类药物可能的新的非调脂抗炎斑块稳定作用机制。目的观察血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1（LOX-1）对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的THP-1单核/巨噬细胞源泡沫细胞（THP-1 monocyte-derivedmacrophages）基质金属蛋白酶-9（MMP-9）基因表达的影响及辛伐他汀的干预作用。方法以不同浓度（10、20、50、100mg/L）ox-LDL诱导THP-1单核/巨噬细胞制备泡沫细胞模型,然后用LOX-1受体阻断剂多聚肌苷酸（PolyⅠ）、辛伐他汀（Simvastatin）分别进行干预,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测不同浓度ox-LDL诱导的THP-1单核/巨噬细胞源泡沫细胞LOX-1、MMP-9mRNA表达水平及干预前后LOX-1、MMP-9mRNA表达水平的变化。通过观察ox-LDL对巨噬源泡沫细胞LOX-1、MMP-9mRNA合成的影响及LOX-1受体阻断后MMP-9表达的变化阐明LOX-1受体在斑块不稳定中的重要意义。并且通过观察辛伐他汀细胞LOX-1、MMP-9mRNA合成的影响,探讨其可能的非调脂抗炎斑块稳定作用机制。结果1)用不同浓度的ox-LDL（10mg/L、20mg/L、50mg/L、100mg/L）分别与THP-1单核/巨噬细胞共同孵育,细胞LOX-1、MMP-9mRNA表达增加,各组间数据比较差异具有统计学意义（P＜0.05）,并与ox-LDL在10～50mg/L范围内呈现剂量-效应关系（相关分析P＜0.05）。100mg/LOX-LDL与细胞共同培养时LOX-1、MMP-9mRNA表达下降可能与高浓度ox-LDL对细胞的毒性作用有关。2)预先用PolyⅠ与THP-1单核/巨噬细胞共同培养1h封闭细胞表面部分LOX-1,再加入50ma/Lox-LDL培养,与未加阻断剂组比较,LOX-1、MMP-9mRNA表达均减少,差异具有统计学意义（P＜0.05）。3)100μmol/L辛伐他汀加入50mg/LoX-LDL与细胞共同进行培养,LOX-1、MMP-9mRNA表达与未干预组比较显著下调,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论ox-LDL上调THP-1单核/巨噬细胞LOX-1、MMP-9mRNA表达,并与ox-LDL在一定范围内呈现剂量-效应关系。LOX-1作为ox-LDL的特异性受体,可介导ox-LDL致巨噬细胞源泡沫细胞MMP-9mRNA表达增加,使动脉粥样硬化斑块中细胞外基质的降解增强纤维帽变薄,斑块趋于不稳定。LOX-1受体拮抗剂多聚肌苷酸可以下调ox-LDL诱导的巨噬细胞源泡沫细胞MMP-9mRNA表达发挥斑块稳定作用。辛伐他汀可以通过下调细胞LOX-1 mRNA的表达减少MMP-9 mRNA的分泌,这或许是他汀类药物发挥非调脂抗炎作用稳定斑块的机制之一。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附录一
• 参考文献
• 综述
• 附录二
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文目录
• 学位论文评阅及答辩情况表