刺梨水提物抗氧化损伤作用研究

论文摘要

氧化损伤会导致器官和组织病变,诱发多种疾病如癌症、老化、动脉粥样硬化、糖尿病以及类风湿性关节炎等。刺梨（ Rose roxburghii Tratt）自然资源丰富,天然、无毒、富含多种营养成分如Vc、超氧化物歧化酶（SOD）、刺梨黄酮、刺梨多糖、人体必须氨基酸等并具有多种功能活性。本试验通过多个体系测定刺梨水提物的抗氧化损伤作用。结果证明刺梨水提物具有较好的抗氧化损伤能力。刺梨水提物中多酚类化合物的含量223.02±12.89 mg/g,黄酮类化合物含量20.41±1.71 mg/g。刺梨水提物对DPPH·自由基、ABTS+·自由基均有较强的清除能力,其清除DPPH·自由基的IC50值为74.93 mg/L,清除ABTS+·自由基的IC50值为153.83 mg/L。刺梨水提物也具有较强的铁还原能力,其FRAP值为1.363 mmol。刺梨水提物对Phen-CuSO4-Vc诱导的DNA氧化损伤有抑制作用,且抑制作用随刺梨水提物浓度的增大而增强。当浓度为15mg/ml时,刺梨水提物对Phen-CuSO4-Vc体系诱导的DNA氧化损伤有66.9%的抑制率。刺梨水提物对Cu2+/H2O2和AAPH诱导的牛血清白蛋白（BSA）的氧化损伤均具有抑制作用,刺梨水提物浓度为10 mg/ml时,蛋白氧化损伤受到显著抑制。刺梨提取物对Cu2+/H2O2诱导的肝匀浆蛋白氧化损伤具有保护作用。刺梨水提物能够抑制氧化损伤导致的蛋白质羰基化,且抑制作用有剂量依赖效应;刺梨水提物能够保护肝匀浆体系内巯基,增强其抗氧化能力,且保护作用随浓度升高而增强。刺梨提取物对Cu2+/H2O2诱导的肝匀浆脂质氧化损伤具有保护作用,能够抑制脂质氧化损伤过程中丙二醛（MDA）和共轭二烯（CD）的形成,且抑制作用随刺梨水提物浓度升高而增强。综上所述,刺梨水提物中活性成分含量较高,具有较强的自由基清除能力,对DNA和蛋白质损伤有很强的抑制作用,对肝匀浆体系内蛋白质和脂质的氧化损伤具有保护作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 氧化应激
• 1.1.1 活性氧/氮
• 1.1.2 蛋白质氧化损伤
• 1.1.3 DNA 氧化损伤
• 1.1.4 脂质氧化损伤
• 1.1.5 氧化应激与疾病
• 1.2 抗氧化剂
• 1.2.1 抗氧化剂的分类
• 1.2.2 常见的天然抗氧化剂
• 1.3 刺梨
• 1.3.1 刺梨资源简介
• 1.3.2 刺梨的营养成分
• 1.3.3 刺梨的生理功能
• 1.3.4 毒性研究
• 1.4 本试验的研究意义及目的
• 第二章 刺梨水提物清除自由基及抗DNA 氧化损伤作用研究
• 2.1 试验方法
• 2.1.1 材料、试剂及仪器
• 2.1.2 刺梨水提物的制备
• 2.1.3 刺梨水提物总酚及总黄酮含量测定
• 2.1.4 刺梨水提物对DPPH·自由基的清除试验
• +·自由基的清除试验'>2.1.5 刺梨水提物对ABTS⁺·自由基的清除试验
• 2.1.6 刺梨水提物铁还原能力/抗氧化能力测定（FRAP 法）
• 2.1.7 刺梨水提物DNA 氧化损伤的作用
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 刺梨水提物中总多酚及总黄酮含量测定
• 2.2.2 刺梨水提物体外抗氧化活性研究结果
• 2.3 小结
• 第三章 刺梨水提物对蛋白质氧化损伤的作用
• 3.1 试验方法
• 3.1.1 仪器与主要试剂
• 3.1.2 考马斯亮蓝染色法检测蛋白质
• 2+/H₂O₂ 诱导蛋白氧化模型的建立'>3.1.3 Cu²⁺/H₂O₂诱导蛋白氧化模型的建立
• 2+/H₂O₂ 诱导蛋白氧化的作用'>3.1.4 刺梨水提物对Cu²⁺/H₂O₂诱导蛋白氧化的作用
• 3.1.5 AAPH 诱导蛋白氧化模型的建立
• 3.1.6 刺梨水提物对AAPH 诱导蛋白氧化的作用
• 3.2 结果与分析
• 2+/H₂O₂ 诱导不同处理时间的蛋白氧化作用'>3.2.1 Cu²⁺/H₂O₂诱导不同处理时间的蛋白氧化作用
• 2+/H₂O₂ 诱导蛋白氧化的保护作用'>3.2.2 刺梨水提物对Cu²⁺/H₂O₂诱导蛋白氧化的保护作用
• 3.2.3 AAPH 诱导不同处理时间蛋白氧化作用
• 3.2.4 刺梨水提物对AAPH 诱导蛋白氧化的保护作用
• 3.3 小结
• 第四章 刺梨水提物对活性氧诱导肝损伤的作用
• 4.1 试验材料及方法
• 4.1.1 实验试剂与仪器
• 4.1.2 肝损伤诱导模型的建立
• 4.1.3 BCA 法测定蛋白浓度
• 4.1.4 羰基（protein carbonyls）的测定
• 4.1.5 巯基含量（protein thiol contents）的测定
• 4.1.6 丙二醛（MDA）的测定
• 4.1.7 共轭二烯（conjugated diene, CD）的测定
• 4.2 试验结果
• 2+/H₂O₂ 诱导的肝匀浆蛋白氧化损伤的作用'>4.2.1 刺梨水提物对Cu²⁺/H₂O₂诱导的肝匀浆蛋白氧化损伤的作用
• 2+/H₂O₂ 诱导肝匀浆脂质氧化损伤的保护作用'>4.2.3 刺梨水提物对Cu²⁺/H₂O₂诱导肝匀浆脂质氧化损伤的保护作用
• 4.3 小结
• 第五章 结论与讨论
• 5.1 结论
• 5.2 讨论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介