论文摘要
目的:探讨转化生长因子β3（Transforming growth factor-β3，TGF-β3）在四氯二苯二噁英（2,3,7,8-tetrachlorodibenzodioxin, TCDD）致胎鼠先天性腭裂中的作用。方法: C57BL/6J小鼠按雌雄各一的比例合笼过夜交配，第二日晨检查雌鼠外阴，见阴栓者记为妊娠第0天（gestational day,GD）。GD10，实验组以TCDD64μg/kg灌胃，对照组以等量玉米油灌胃。于GD18.5解剖显微镜下观察胎鼠腭裂的发生率，并于GD13.5、GD14.5和GD15.5剪取胎鼠腭突组织提取DNA、RNA及蛋白，采用逆转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR）和Western blot检测TGF-β3基因的表达情况、RT-PCR检测Smad2～4及Smad7表达情况、甲基化特异性PCR（Methylmion Specific PCR，MSP）检测TGF-β3基因启动子甲基化水平。结果: TCDD可成功诱导建立C57BL/6J小鼠先天性腭裂模型，实验组腭裂发生率为100%，对照组无腭裂发生，实验组和对照组腭裂发生率具有统计学差异（P<0.05）。在GD13.5、GD14.5和GD15.5，RT-PCR及Western-blot均显示实验组TGF-β3基因表达显著高于对照组（P<0.05）。RT-PCR显示实验组和对照组Smad2～4及Smad7表达无显著差异。MSP提示实验组和对照组TGF-β3基因启动子均处于非甲基化状态。结论:本研究证实，TCDD可致C57BL/6J胎鼠发生先天性腭裂，并显著上调TGF-β3基因在整个腭突融合过程中的表达。TGF-β3的过高表达可能是TCDD诱发先天性腭裂的主干信号通路之一，但可能并非通过经典的TGF-β/Smad信号通路和TGF-β3基因甲基化修饰而发生作用。
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